题目内容
生物技术在新类型生物培育、疾病征服等方面展现出诱人的前景．请根据以下材料回答相关问题：
材料一：2008年诺贝尔化学奖授予了三位在研究绿色荧光蛋白（GFP）方面做出突出贡献的科学家．绿色荧光蛋白能在蓝光或紫外光的激发下发出荧光，这样借助GFP发出的荧光就可以跟踪蛋白质在细胞内部的移动情况，帮助推断蛋白质的功能．GFP基因可作为目的基因用于培育绿色荧光小鼠，如图表示培育绿色荧光小鼠的基本流程：
请根据上述材料回答下列问题：
（1）用于培育绿色荧光小鼠的基因表达载体的组成必需有启动子、 和 ．图中过程②常用的方法是 ；过程③利用的生物技术是 ；在进行过程④前，利用 技术可以获得数目更多且基因型相同的绿色荧光小鼠．
（2）GFP基因与目的基因一起构建到载体上不影响目的基因的表达，也不影响由目的基因控制合成的蛋白质的结构与功能，且对细胞无毒性作用，因此GFP基因可以作为基因表达载体上 ．
（3）目前科学家们通过 工程制造出了蓝色荧光蛋白、黄色荧光蛋白等，该工程是通过改造 来实现预定目标的．
材料二：[HTK]运用细胞培养技术可以从哺乳动物的早期胚胎中获得胚胎干细胞．
（4）在细胞培养中，随着细胞传代次数的增多，绝大部分细胞分裂停止，但极少数细胞克服细胞寿命的自然极限，获得 ，朝着等同于癌细胞的方向发展，该种细胞由于细胞膜上 减少，导致细胞间的黏着性 ．
（5）在动物细胞体外培养过程中，一般要满足四个方面的条件：无菌、无毒的环境、营养、温度和pH和气体环境，其中在培养液中添加 ，以防培养过程中的污染；由于人们对细胞所需的营养物质还没有完全搞清楚，故在使用合成培养基时，通常需加入 等天然成分．
（6）在培养过程中，必须用 处理内细胞团，使之分散成单个细胞．
（7）体外培养胚胎干细胞的结构特点是 ．
材料一：2008年诺贝尔化学奖授予了三位在研究绿色荧光蛋白（GFP）方面做出突出贡献的科学家．绿色荧光蛋白能在蓝光或紫外光的激发下发出荧光，这样借助GFP发出的荧光就可以跟踪蛋白质在细胞内部的移动情况，帮助推断蛋白质的功能．GFP基因可作为目的基因用于培育绿色荧光小鼠，如图表示培育绿色荧光小鼠的基本流程：
请根据上述材料回答下列问题：
（1）用于培育绿色荧光小鼠的基因表达载体的组成必需有启动子、
（2）GFP基因与目的基因一起构建到载体上不影响目的基因的表达，也不影响由目的基因控制合成的蛋白质的结构与功能，且对细胞无毒性作用，因此GFP基因可以作为基因表达载体上
（3）目前科学家们通过
材料二：[HTK]运用细胞培养技术可以从哺乳动物的早期胚胎中获得胚胎干细胞．
（4）在细胞培养中，随着细胞传代次数的增多，绝大部分细胞分裂停止，但极少数细胞克服细胞寿命的自然极限，获得
（5）在动物细胞体外培养过程中，一般要满足四个方面的条件：无菌、无毒的环境、营养、温度和pH和气体环境，其中在培养液中添加
（6）在培养过程中，必须用
（7）体外培养胚胎干细胞的结构特点是
考点：基因工程的原理及技术,动物细胞与组织培养过程,胚胎分割移植,干细胞的概念及种类
专题：
分析：一：1、分析图解：图中①表示基因表达载体的构建，②表示目的基因导入受体细胞，③表示早期胚胎培养、④表示胚胎移植，⑤表示分娩出转基因小鼠．
2、基因工程的基本操作步骤主要包括四步：①目的基因的获取；②基因表达载体的构建；③将目的基因导入受体细胞；④目的基因的检测与鉴定．
3、基因表达载体的组成：目的基因+启动子+终止子+标记基因．
4、蛋白质工程--指以蛋白质的结构规律及其与生物功能的关系作为基础，通过基因修饰或基因合成，对现有蛋白质进行基因改造，或制造一种心的蛋白质，以满足人类的生产和生活的需要．
二、胚胎干细胞
1、胚胎干细胞简称ES或EK细胞，来源于早期胚胎或原始性腺（即囊胚期的内细胞团）．
2、特点：具有胚胎细胞的特性，体积较小，细胞核大，核仁明显；在功能上，具有发育的全能性，可分化为成年动物任何一种组织细胞．另一方面，在体外培养条件下，ES细胞可不断增殖而不发生分化，可进行冷冻保存，也可以进行某些遗传改造．
2、基因工程的基本操作步骤主要包括四步：①目的基因的获取；②基因表达载体的构建；③将目的基因导入受体细胞；④目的基因的检测与鉴定．
3、基因表达载体的组成：目的基因+启动子+终止子+标记基因．
4、蛋白质工程--指以蛋白质的结构规律及其与生物功能的关系作为基础，通过基因修饰或基因合成，对现有蛋白质进行基因改造，或制造一种心的蛋白质，以满足人类的生产和生活的需要．
二、胚胎干细胞
1、胚胎干细胞简称ES或EK细胞，来源于早期胚胎或原始性腺（即囊胚期的内细胞团）．
2、特点：具有胚胎细胞的特性，体积较小，细胞核大，核仁明显；在功能上，具有发育的全能性，可分化为成年动物任何一种组织细胞．另一方面，在体外培养条件下，ES细胞可不断增殖而不发生分化，可进行冷冻保存，也可以进行某些遗传改造．
解答：
解：（1）根据题意可知，绿色荧光小鼠的基因为该转基因技术中的标记基因，因此其基因表达载体的组成必需有启动子、GFP基因（标记基因）和终止子．图中过程②表示目的基因导入受体细胞，由于该细胞为动物的受精卵，因此常用显微注射法；过程③利用的生物技术是早期胚胎培养技术（细胞培养技术）；在进行过程④胚胎移植前，利用胚胎分割技术可以获得数目更多且基因型相同的绿色荧光小鼠．
（2）GFP基因与目的基因一起构建到载体上不影响目的基因的表达，也不影响由目的基因控制合成的蛋白质的结构与功能，且对细胞无毒性作用，因此GFP基因可以作为基因表达载体上标记基因．
（3）目前科学家们通过蛋白质工程制造出了蓝色荧光蛋白、黄色荧光蛋白等，该工程是通过改造GFP基因（绿色荧光蛋白基因）来实现预定目标的．
（4）在细胞培养中，随着细胞传代次数的增多，绝大部分细胞分裂停止，但极少数细胞克服细胞寿命的自然极限，获得不死性，朝着等同于癌细胞的方向发展，该种细胞由于细胞膜上糖蛋白减少，导致细胞间的黏着性降低．
（5）在动物细胞体外培养过程中，一般要满足四个方面的条件：无菌、无毒的环境、营养、温度和pH和气体环境，其中在培养液中添加抗生素，以防培养过程中的污染；由于人们对细胞所需的营养物质还没有完全搞清楚，故在使用合成培养基时，通常需加入血清、血浆等天然成分．
（6）在培养过程中，由于细胞之间有胞间连丝，其化学本质为蛋白质，因此必须用胰蛋白酶处理内细胞团，使之分散成单个细胞．
（7）体外培养胚胎干细胞的结构特点是体积小、细胞核大、核仁明显．
故答案为：
（1）GFP基因 终止子 显微注射法 早期胚胎培养技术（细胞培养技术） 胚胎分割
（2）标记基因
（3）蛋白质 GFP基因（绿色荧光蛋白基因）
（4）不死性 糖蛋白 降低
（5）抗生素 血清、血浆
（6）胰蛋白酶
（7）体积小、细胞核大、核仁明显
（2）GFP基因与目的基因一起构建到载体上不影响目的基因的表达，也不影响由目的基因控制合成的蛋白质的结构与功能，且对细胞无毒性作用，因此GFP基因可以作为基因表达载体上标记基因．
（3）目前科学家们通过蛋白质工程制造出了蓝色荧光蛋白、黄色荧光蛋白等，该工程是通过改造GFP基因（绿色荧光蛋白基因）来实现预定目标的．
（4）在细胞培养中，随着细胞传代次数的增多，绝大部分细胞分裂停止，但极少数细胞克服细胞寿命的自然极限，获得不死性，朝着等同于癌细胞的方向发展，该种细胞由于细胞膜上糖蛋白减少，导致细胞间的黏着性降低．
（5）在动物细胞体外培养过程中，一般要满足四个方面的条件：无菌、无毒的环境、营养、温度和pH和气体环境，其中在培养液中添加抗生素，以防培养过程中的污染；由于人们对细胞所需的营养物质还没有完全搞清楚，故在使用合成培养基时，通常需加入血清、血浆等天然成分．
（6）在培养过程中，由于细胞之间有胞间连丝，其化学本质为蛋白质，因此必须用胰蛋白酶处理内细胞团，使之分散成单个细胞．
（7）体外培养胚胎干细胞的结构特点是体积小、细胞核大、核仁明显．
故答案为：
（1）GFP基因 终止子 显微注射法 早期胚胎培养技术（细胞培养技术） 胚胎分割
（2）标记基因
（3）蛋白质 GFP基因（绿色荧光蛋白基因）
（4）不死性 糖蛋白 降低
（5）抗生素 血清、血浆
（6）胰蛋白酶
（7）体积小、细胞核大、核仁明显
点评：本题考查了基因工程、蛋白质工程、胚胎工程等多个现代生物技术，意在考查考生的识记能力和综合运用能力．考生要能够把握所学知识的内在联系，识记相关知识点，如：基因表达载体的构成、胚胎干细胞的动物细胞培养技术的过程和培养基等；考生还要能够明确动物细胞培养和胚胎移植技术在动物基因工程中的应用．
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