题目内容

8.糖尿病神经病变是糖尿病常见的慢性并发症之一,糖尿病患者中老年痴呆的发病率明显高于正常老年人.现已证明老年痴呆症患者的神经小胶质细胞能分泌大量 IL-1β,诱导神经细胞损伤从而导致认知障碍和记忆力下降.有学者发现天麻素对治疗老年痴呆有很好的疗效.为研究天麻素对高糖诱导的神经小胶质细胞IL-1β基因表达的影响,请你利用以下实验材料,提出实验思路,并回答有关问题.
材料与用具:细胞培养瓶若干、小鼠神经小胶质瘤细胞(BV-2 细胞)悬液、细胞培养液、高糖细胞培养液、浓度为25mg/L、50mg/L和100mg/L的天麻素溶液(用高糖细胞培养液配制)等.
(要求与说明:培养液中IL-1浓度的具体测定方法不做要求;IL-1β相对表达量=实验组IL-1浓度/对照组IL-1β浓度; 实验条件适宜)
(1)实验思路
①①取若干培养瓶均分为5组,编号为1--5,分别加入适量且等量的细胞培养液和BV-2细胞悬液;
②分别在1-4组培养瓶中依次加入适量且等量的高糖细胞培养液、浓度为25mg/L、50mg/L和100mg/L的天麻素溶液;第五组加入与前4组等量的细胞培养液,各组培养瓶同时置于相同且适宜的条件下培养;
③各组培养瓶同时置于相同且适宜的条件下培养,24小时后(或培养相同时间后),分别测定各组培养液中的IL-1β浓度,并记录;
④计算各组BV-2细胞的IL-1β相对表达量,分析数据得出结论.
(2)实验证明,50mg/L的天麻素能有效抑制高糖诱导的神经小胶质细胞IL-1β基因表达,请用柱形图来表示实验结果.
(3)为进一步证明各组小鼠神经小胶质瘤细胞存在IL-1β表达的差异,需要检测各组细胞中的IL-1βmRNA含量.

分析 实验操作步骤的安排一般如下:
第一步:取材随机均分为几组,编号;
第二步:不同组自变量的处理;
第三步:把上述各组放在无关变量相同且适宜等条件下处理一段时间;
第四步:观察并记录比较相应的因变量.

解答 解:(1)分析实验可知,实验的自变量为“天麻素溶液浓度”,因变量为“培养液中的IL-1β浓度”,并且需要设置空白对照实验,因此实验思路如下:
①取若干培养瓶均分为5组,编号为1--5,分别加入适量且等量的细胞培养液和BV-2细胞悬液;
②分别在1-4组培养瓶中依次加入适量且等量的高糖细胞培养液、浓度为25mg/L、50mg/L和100mg/L的天麻素溶液;第五组加入与前4组等量的细胞培养液,各组培养瓶同时置于相同且适宜的条件下培养;
③各组培养瓶同时置于相同且适宜的条件下培养,24小时后(或培养相同时间后),分别测定各组培养液中的IL-1β浓度,并记录;
④计算各组BV-2细胞的IL-1β相对表达量,分析数据得出结论.
(2)实验证明,50mg/L的天麻素能有效抑制高糖诱导的神经小胶质细胞IL-1β基因表达,因此其相对表达量最低,而没有高糖的“细胞培养液”表达量为1,其它均较高,柱形图如下:

(3)为进一步证明各组小鼠神经小胶质瘤细胞存在IL-1β表达的差异,需要检测各组细胞中的IL-1βmRNA含量.
故答案为:
(1)实验思路
①取若干培养瓶均分为5组,编号为1--5,分别加入适量且等量的细胞培养液和BV-2细胞悬液;
②分别在1-4组培养瓶中依次加入适量且等量的高糖细胞培养液、浓度为25mg/L、50mg/L和100mg/L的天麻素溶液;第五组加入与前4组等量的细胞培养液,各组培养瓶同时置于相同且适宜的条件下培养;
③各组培养瓶同时置于相同且适宜的条件下培养,24小时后(或培养相同时间后),分别测定各组培养液中的IL-1β浓度,并记录;
④计算各组BV-2细胞的IL-1β相对表达量,分析数据得出结论.
(2)实验结果

(3)各组细胞中的IL-1βmRNA含量(或细胞内IL-1β含量)

点评 本题考查血糖调节及相关的探究实验,这要求考生具有对一些生物学问题进行初步探究的能力,能根据实验目的和实验原则完善实验过程,并能根据题中信息得出正确的结论.

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