Question

5．尿素是一种重要的农业肥料，但若不经细菌的分解，就不能很好地被植物利用．生活在土壤中的微生物种类和数量繁多，同学们设计了以下实验来探究土壤中微生物对尿素的分解作用，并成功筛选到能高效降解尿素的细菌（目的菌）．培养基成分如下表所示．

KH2PO4	1.4g
Na2HPO4	2.1g
MgSO4•7H2O	0.2g
葡萄糖	10g
尿素	1g
琼脂	15g
将上述物质溶解后，用蒸馏水定容到1000mL

回答问题
（1）“目的菌”生长所需的碳源和氮源分别来自培养基中的葡萄糖和尿素．
（2）为说明上表所示培养基具有选择作用，应配置含有牛肉膏蛋白胨（填物质名称）的培养基作为实验对照，如果对照培养基上的菌落数明显多于（选填“多于”或“少于”）表中培养基中的菌落数目，说明表中培养基已筛选出一些目的菌．
（3）此培养基不能（选填“能”或者“不能”）用于植物组织培养，理由是该培养基中缺少植物激素（或缺少植物需要的各种营养）．
（4）一般通过稀释涂布平板法统计菌落数来推算细菌数量，但统计的菌落数往往比活菌的实际数目少（选填“少”或“多”），原因是当两个或多个细胞连在一起时，平板上观察到的只是一个菌落．
（5）与分解尿素的细菌相比，纤维素分解菌的筛选过程中用到刚果红染色法法，这种方法只是分离纯化的第一步，为了确定得到的是纤维素分解菌，还需要进行发酵生产纤维素酶的实验．

Answer 1

分析 微生物的培养基含有较多的有机物，培养基的主要营养物质包括碳源、氮源水和无机盐等．用于植物组织培养的MS培养基含有较多的大量元素和微量元素及植物激素．选择培养基的目的是筛选目的菌，在固体培养基上接种的方法通常是稀释涂布平板法和平板划线法．接种过程中培养基、接种器具要灭菌，操作者的双手和环境要消毒．

解答 解：（1）据表分析，“目的菌”生长所需的碳源和氮源分别来自培养基中的葡萄糖和尿素．
（2）题表中的培养基是选择培养基，为说明上表所示培养基具有选择作用，应配置含有牛肉膏蛋白胨的培养基作为对照试验，对照组的培养基没有选择作用，几乎大多数的微生物当生长，故如果对照培养基上的菌落数明显多于表中培养基中的菌落数目，说明表中培养基已筛选出一些目的菌．
（3）此培养基不能用于植物组织培养，因为缺少植物激素，植物激素的用量及使用顺序影响植物组织培养．
（4）用稀释涂布平板法进行微生物计数时，由于所产生的菌落可能是由两个或多个细胞形成的，所以统计的菌落数往往比活菌的实际数目偏少．
（5）与分解尿素的细菌相比，纤维素分解菌的筛选过程中用到刚果红染色法，这种方法只是分离纯化的第一步，为了确定得到的是纤维素分解菌，还需要进行发酵生产纤维素酶的实验．
故答案为：
（1）葡萄糖    尿素
（2）牛肉膏蛋白胨    多于
（3）不能    缺少植物激素（或缺少植物需要的各种营养）
（4）少    当两个或多个细胞连在一起时，平板上观察到的只是一个菌落（一个菌落可来源于一个或多个细胞，合理答案均可给分）
（5）刚果红染色法   纤维素酶

点评 本题主要考查微生物的筛选与分离，意在强化相关实验操作的过程，提高学生的实验技能．