题目内容

1．某一质粒载体如图所示，外源DNA插入到Ampr或Tetr中会导致相应的基因失活（Ampr表示氨苄青霉素抗性基因，Tetr表示四环素抗性基因）．有人将此质粒载体用BamHI酶切后，与用BamHI酶切获得的目的基因混合，加入DNA连接酶进行连接反应，用得到的混合物直接转化大肠杆菌，结果大肠杆菌有的未被转化，有的被转化．被转化的大肠杆菌有三种，分别是含有环状目的基因、含有质粒载体、含有插入了目的基因的重组质粒的大肠杆菌．回答下列问题：
（1）限制性核酸内切酶作为基因工程的工具，其作用特点是识别双链DNA分子的某种特定核苷酸序列，并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断开．
（2）如果用含有氨苄青霉素的培养基进行筛选，在上述四种大肠杆菌细胞中，未被转化的和仅含有环状目的基因的细胞是不能区分的，其原因是二者均不含有氨苄青霉素抗性基因，在该培养基上均不生长；并且含有质粒载体和含有插入了目的基因的重组质粒（或重组质粒）的细胞也是不能区分的，其原因是二者均含有氨苄青霉素抗性基因，在该培养基上均能生长．在上述筛选的基础上，若要筛选含有插入了目的基因的重组质粒的大肠杆菌的单菌落，还需使用含有四环素的固体培养基．
（3）基因工程中，某些噬菌体经改造后可以作为载体，其DNA复制所需的模板来自于噬菌体．

分析 “分子运输车”--载体
（1）载体具备的条件：①能在受体细胞中复制并稳定保存．
②具有一至多个限制酶切点，供外源DNA片段插入．
③具有标记基因，供重组DNA的鉴定和选择．
（2）最常用的载体是质粒，它是一种裸露的、结构简单的、独立于细菌染色体之外，并具有自我复制能力的双链环状DNA分子．
（3）其它载体：噬菌体的衍生物、动植物病毒．

解答 解：（1）限制性核酸内切酶作为基因工程的工具，限制酶能识别双链DNA分子的某种特定核苷酸序列，并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断开．
（2）由于未被转化的和仅含有环状目的基因的大肠杆菌中不含有氨苄青霉素抗性基因，因此如果用含有氨苄青霉素的培养基进行筛选，未被转化的和仅含有环状目的基因的大肠杆菌均不能存活，因此两者是不能区分的；含有质粒的大肠杆菌和 含重组质粒的大肠杆菌的细胞由于均含有氨苄青霉素抗性基因，在含有氨苄青霉素的培养基上都能生长，因此两者也是不能区分的．在上述筛选的基础上，若要筛选含有插入了目的基因的重组质粒的大肠杆菌的单菌落，还需使用含有四环素的固体培养基，即含有重组质粒的大肠杆菌在其中不能生长，而含有普通质粒的大肠杆菌能生长．
（3）基因工程中，某些噬菌体经改造后可以作为载体，其DNA复制所需的模板来自于噬菌体，原料来自于受体细胞．
故答案为：
（1）识别双链DNA分子的某种特定核苷酸序列，并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断开
（2）二者均不含有氨苄青霉素抗性基因，在该培养基上均不生长
含有质粒载体     含有插入了目的基因的重组质粒（或重组质粒）
二者均含有氨苄青霉素抗性基因，在该培养基上均能生长     四环素
（3）噬菌体

点评 本题考查了基因工程的有关知识，要求考生能够识记质粒作为运载体的条件，掌握目的基因检测和鉴定的方法，再结合题干信息准确分析．

练习册系列答案
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17．RNA分子中不具有的碱基是（　　）
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14．下列有关氨基酸、多肽链和蛋白质的叙述正确的是（　　）
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（3）分析ABCD四点生长素的作用A促进、B促进、C促进、D抑制（填“促进”或“抑制”）．（4）试分析出现根向地生长的原因是植物的根系在生长过程中由于重力的作用向地的一面生长素浓度高，高浓度生长素对植物根有抑制生长的作用，所以根系向近地的一面弯曲生长，表现为向下生长．，茎背地生长的原因是由于受重力影响，茎的近地侧生长素浓度高于远地侧，且生长效应强于远地侧．．（提示：考虑根和茎对生长素的敏感性不同）
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6．回答下列关于腐乳制作的问题：
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（2）发酵完成后，需装瓶加盐腌制，瓶子一般采用的消毒方法是煮沸消毒法，向长满毛霉的豆腐块加盐，其作用是析出豆腐中的水分，使豆腐块变硬．同时，盐还能抑制微生物的生长，避免豆腐块腐败变质．腐乳制作的后期可加入卤汤．卤汤是由酒及各种香辛料配制而成的
（3）封瓶的时候，需要把瓶口在酒精灯火焰上过一下，原因是防止瓶口被微生物污染．
（4）含水量高的豆腐不适合用来做腐乳一般含水量为70%的豆腐最佳．
13．原始生命诞生于原始海洋，下列有关生物体与水的关系的叙述中正确的是（　　）
A．高渗环境中的植物可以通过液泡中贮存大量的Na+等无机盐从而促进细胞吸收水分
B．贮藏的干种子不含自由水，以保持细胞的休眠状态
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