题目内容

17．表中列出了几种限制酶识别序列及其切割位点，图1、图2中箭头表示相关限制酶的酶切位点．请回答下列问题：

限制酶MseⅠPstⅠEcoRⅠSmaⅠ
识别序列及切割位点GAAT↓TAATTC
CTTAATT↑TAAG		G↓TGCAG
GACGT↑C		G↓AATTC
CTTAA↑G		CCC↓GGG
GGG↑CCC
（1）若图2中目的基因D是人的α-抗胰蛋白酶的基因，现在要培养乳汁中含α-抗胰蛋白酶的羊，研究者需将该基因通过（方法）注入到羊的受精卵中，则发育成的羊有可能分泌含α-抗胰蛋白酶的乳汁．这一过程涉及到以下哪些过程ABD（多选）．
A．DNA自我复制B．DNA以其一条链为模板合成RNA
C．RNA自我复制D．按照RNA上密码子的排列顺序合成蛋白质
（2）若图2中目的基因D需要同时使用MetⅠ和PstⅠ才能获得，而图1所示的质粒无相应的限制酶酶切位点．所以在该质粒和目的基因构建重组质粒时，需要对质粒改造，构建新的限制酶酶切位点．试帮助完成构建需要的限制酶酶切位点的思路（选填①-⑤）：
①EcoRⅠ②MetⅠ③PstⅠ④DNA连接酶⑤DNA聚合酶
首先用①EcoRⅠ处理质粒；然后用⑤DNA聚合酶处理质粒，使被切开的质粒末端连接上相应的脱氧核苷酸；再用④DNA连接酶处理质粒，形成了的限制酶酶切割位点，它可被②识别．
（3）检测筛选是一个重要步骤．图3表示在一系列培养皿的相同位置上能出现相同菌落的一种接种方法与培养方法，以检测基因表达载体是否导入大肠杆菌．培养基除了含有细菌生长繁殖必需的成分外，培养基A和培养基B分别还含有四环素和青霉素．从筛选结果分析，含目的基因的是4、6（填编号）菌落中的细菌．
（4）DNA分子中，一条链的两个核苷酸通过磷酸二酯键连接．如要检测目的基因是否成功表达，须提取培养后大肠杆菌解的总蛋白，用相应抗体检测．

分析 分析表格：限制酶Sma I的识别序列是CCCGGG，在C和G之间切割；限制酶Xma I的识别序列是CCCGGG，在第一个C和第二个C之间切割．
分析图1、图2：质粒只有EcoR I酶和Pst I酶的识别位点，外源DNA分子含有Mse I酶、EcoR I酶和Pst I酶识别位点，且切割获得目的基因需要Mse I酶和Pst I酶．
分析图3：质粒上含有两个抗性基因，即四环素抗性基因和青霉素抗性基因．对质粒进行改造时，已将青霉素抗性基因破坏，所以含重组质粒的大肠杆菌能在含有四环素的培养基上生存，但在含有青霉素的培养基上不能生存．

解答 解：（1）A、人的α-抗胰蛋白酶基因的DNA片段在羊的受精卵中，能整合到其染色体上，随着其复制而复制：DNA→DNA，A正确；
B、该受精卵发育的羊能分泌含α-抗胰蛋白酶的奶，说明目的基因已表达成功：DNA→mRNA→蛋白质（抗胰蛋白酶），B正确；
C、RNA以自身为模板自我复制只能发生在以RNA作为遗传物质的生物中，C错误；
D、按照mRNA密码子的排列顺序合成蛋白质，即翻译形成抗胰蛋白酶，D正确．
故选：ABD．
（2）对质粒改造使，需构建新的限制酶酶切位点．首先用①EcoRⅠ处理质粒；然后用⑤DNA聚合酶处理质粒，使被切开的质粒末端连接上相应的脱氧核苷酸；再用④DNA连接酶处理质粒，形成了的限制酶酶切割位点，这样它可被②MetⅠ识别．
（3）由图可知，质粒上含有两个抗性基因，即四环素抗性基因和青霉素抗性基因．对质粒进行改造时，已将青霉素抗性基因破坏，所以含重组质粒的大肠杆菌能在含有四环素的培养基上生存，但在含有青霉素的培养基上不能生存．所以图中培养基除了含有细菌生长繁殖必需的成分外，培养基A和培养基B分别还含有四环素和青霉素，在含有四环素的培养基上能生存，在含有青霉素的培养基上不能生存的4和6菌落就是含有目的基因的菌落．
（4）DNA分子中，一条链中的两个核苷酸通过磷酸二酯键相连；检测目的基因是否成功表达，须提取培养后大肠杆菌的总蛋白，通过抗原抗体杂交试验，用相应抗体检测．
故答案为：
（1）受精卵      ABD
（2）①EcoRⅠ⑤DNA聚合酶   ④DNA连接酶
（3）四环素和青霉素   4、6
（4）磷酸二酯键    总蛋白

点评 本题考查基因工程的相关知识，要求考生识记基因工程的操作工具及具体的操作步骤，掌握各步骤中的相关细节，能结合题干信息准确答题，属于考纲识记和理解层次的考查．

练习册系列答案
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7．已知小鼠皮毛的颜色黑色为显性性状，黄色为隐性性状．用一只杂合的黑色公鼠与一只杂合的黑色母鼠交配，生下4只小鼠，可能的情况为（　　）
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C．三黑一黄D．A、B、C三项都有可能
8．图为植物组织培养过程的示意图．

下列对该图的叙述，正确的是（　　）
A．将①经脱分化培养成②时，再植上人造种皮即可获得人造种子
B．植物组织培养所依据的生物学原理为细胞的全能性
C．③→④过程指植物的营养生长和生殖生长阶段
D．②→③的再分化过程中，诱导②生根的激素为生长素
5．有氧呼吸过程中，产生二氧化碳的阶段是（　　）
A．第一阶段B．第二阶段C．第三阶段D．第一、二、三阶段
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A．反馈调节只存在于激素调节中
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9．细胞周期包括分裂间期（分为G1期、S期和G2期）和分裂期（M期）．下图标注了甲动物（体细胞染色体数为12）肠上皮细胞的细胞周期各阶段的时长及DNA含量．请冋答下列问题：
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（4）在光学显微镜下观察，同处于分裂末期的动物肠上皮细胞与洋葱根尖细胞，形态上最主要的区别是动物肠上皮细胞膜凹陷，细胞缢裂；洋葱根尖细胞形成细胞板．
6．现提供纯种的高茎叶腋花和矮茎茎顶花的豌豆，叶腋花（E）对茎顶花（e）为显性，现欲利用以上两种豌豆设计出最佳实验方案，探究控制叶腋花、茎顶花的等位基因是否与控制高茎、矮茎的等位基因在同一对同源染色体上，并做出判断（假设没有发生交换）．
（1）方案：（用遗传图解表示，并标明亲代及子代表现型）
（2）实验结果预期及结论（要求推测上述实验中子代性状分离比，并据此作出判断）：
①取纯种的高茎叶腋花和矮茎茎顶花的豌豆杂交得F1，让其自交，如果F2出现四种性状，其性状分离比为9：3：3：1，说明符合基因的自由组合定律，因此控制叶腋花、茎顶花的等位基因与控制高茎、矮茎的等位基因不在同一对同源染色体上；若分离比为3：1，则可能是位于同一对同源染色体上；
②取纯种的高茎叶腋花和矮茎茎顶 花的豌豆杂交得F1，F1与纯种矮茎茎顶花豌豆测交，如果测交后代出现四种性状，其性状分离比为1：1：1：1，说明符合基因的自由组合定律，因此控制叶腋花、茎顶花的等位基因与控制高茎、矮茎的等位基因不在同一对同源染色体上；若分离比为1：1，则可能是位于同一对同源染色体上．
7．如图是动物细胞亚显微结构模式图，据图回答问题：
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