Question

酿酒厂常用酸性脲酶去除酒精类饮品中的尿素，以改善酒精类饮品的品质．请回答下列问题：
（1）从土壤中筛选酸性脲酶生产菌，其培养基的主要成分有葡萄糖、尿素、琼脂等，从功能上分析，该培养基属于

 

培养基．该培养基的氮源来自

 

，碳源是

 

．
（2）筛选和纯化酸性脲酶生产菌常用的两种接种方法是

 

和

 

．配制浓度梯度为10^-1的系列稀释液时，需用移液管将1mL菌液移入盛有

 

mL蒸馏水的试管中…
（3）对同一浓度的酸性脲酶生产菌稀释液，分别用血球计数板计数和稀释涂布平板法计数，若不存在实验误操作，则前者的数量

 

（多于/等于/小于）后者，其原因是

 

．
（4）若用海藻酸钠固定含酸性脲酶的细菌时，应将海藻酸钠溶液和细胞混合滴入

 

溶液中．右表是不同浓度海藻酸钠形成的凝胶珠状况，从表中看出，海藻酸钠的浓度应选用

 

g/dL．若利用固定化酶技术，它的优点是

 

．

海藻酸钠质量浓度（g/dL）	凝胶 强度	凝胶 气泡量	成球 难度	凝珠 形状
1.0	中	没有	较易	扁圆形
2.0	中	少量	易	圆球形
3.0	强	较多	稍难	有托尾
4.0	强	大量	难	难成球形

Answer 1

考点：培养基对微生物的选择作用,微生物的分离和培养

专题：

分析：从土壤中分离微生物的一般步骤是：土壤取样、选择培养、梯度稀释、涂布培养和筛选菌株．从土壤中筛选酸性脲酶生产菌，要使用以尿素为唯一氮源的选择培养基，碳源应该使用葡萄糖．在固体培养基上接种常用的方法主要有稀释涂布平板法和平板划线法，使用稀释涂布平板法进行微生物计数时，结果可能会偏小．用海藻酸钠固定含酸性脲酶的细菌时，应将海藻酸钠溶液和细胞混合滴入CaCl₂溶液中，利用固定化酶技术的优点是可重复利用，且利于产物的纯化．

解答： 解：（1）培养基的主要成分有葡萄糖、尿素、琼脂等，从功能上分析，尿素是唯一的氮源，所以该培养基属于选择培养基，葡萄糖主要作为碳源和能源．
（2）在固体培养基上接种常用的方法主要有稀释涂布平板法和平板划线法．配制浓度梯度为10^-1的系列稀释液时，溶液总量为10mL，需用移液管将1mL菌液移入盛9mL蒸馏水的试管中．
（3）使用稀释涂布平板法进行微生物计数时，有些菌落连接在一起，结果可能会偏小．
（4）用海藻酸钠固定含酸性脲酶的细菌时，应将海藻酸钠溶液和细胞混合滴入CaCl₂溶液中，利用固定化酶技术的优点是可重复利用，且利于产物的纯化．
故答案为：
（1）选择    尿素     葡萄糖
（2）平板划线法      稀释涂布平板法    9
（3）多于     有些菌落连接在一起，计数偏小
（4）CaCl₂ 2.0      可重复利用，且利于产物的纯化

点评：本题主要考查菌种的筛选、灭菌的方法和固定化细胞的知识点，意在加强学生相关知识点的识记与理解．