题目内容
20.如图为利用人成纤维细胞(具分裂能力、能在HAT培养基上存活)和小鼠骨髓瘤细胞(具分裂能力、不能在HAT培养基上存活)进行人类基因定位的操作示意图,请回答相关问题.(1)图示方法是动物细胞融合技术的应用,该技术的基础是动物细胞培养技术.
(2)操作所用的成纤维细胞应传代10代以内,诱导融合时需要加入的促融剂是PEG(或灭活病毒).
(3)人、鼠细胞先经过细胞膜融合形成,再经过一次多(双)核细胞有丝分裂,形成单核细胞.
(4)HAT培养基起选择培养作用,培养时温度应为36.5±0.5℃,操作中加入乌本苷的目的是除去成纤维细胞.
(5)下表所示为杂交细胞A、B、C、D中存在的人类染色体及人类特有的4种酶(+表示存在,-表示不存在),这4种酶均为单基因编码产生,据表推断,编码酶Ⅰ的基因位于1染色体上,编码酶Ⅱ和Ⅳ的基因位于染色体2上.
| 杂交细胞 | 酶 | 人类染色体 | |||||
| Ⅰ | Ⅱ | Ⅲ | Ⅳ | 1 | 2 | 3 | |
| A | - | + | + | + | - | + | - |
| B | + | - | + | - | + | - | - |
| C | - | - | - | - | - | - | + |
| D | + | + | - | + | + | + | + |
分析 1、分析题图:图示为利用人成纤维细胞(具分裂能力、能在HAT培养基上存活)和小鼠骨髓瘤细胞(具分裂能力、不能在HAT培养基上存活)进行人类基因定位的操作示意图,成纤维细胞和小鼠骨髓瘤细胞在促融剂的作用下形成三种杂交细胞,即成纤维细胞自身融合细胞、小鼠骨髓瘤细胞自身融合的细胞和杂交细胞;在HAT培养基上筛选出成纤维细胞自身融合细胞和杂交细胞;加人鸟本苷的目的是除去成纤维细胞,留下杂交细胞.
2、分析表格:杂交细胞A中存在2号染色体,表达出酶Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ;杂交细胞B存在1号染色体,表达出酶Ⅰ、Ⅲ;杂交C存在3号染色体,不能表达出这四种酶;杂交细胞D存在1、2和3号染色体,表达出酶表达出酶Ⅰ、Ⅱ和Ⅳ.
解答 解:(1)由图分析,该过程为动物细胞融合,其基础是动物细胞培养.
(2)目前使用的正常细胞通常为10代以内的,因为10代以内的细胞可以保持细胞正常的二倍体核型.诱导两个动物细胞融合的方法:物理(离心、振动、电刺激)、化学(PEG)、生物诱导(灭活的病毒).
(3)人、鼠细胞先经过细胞膜融合形成多核细胞,经过一次有丝分裂,形成单核细胞.
(4)据题干信息,人成纤维细胞能在HAT培养基上存活,而小鼠骨髓瘤细胞不能在HAT培养基上存活,则HAT培养基起选择培养作用,筛选出人成纤维细胞和成纤维细胞融合的杂交细胞;动物细胞培养的适宜温度为36.5±0.5℃;由图可知,操作中加人鸟本苷的目的是除去成纤维细胞,筛选出杂交细胞.
(5)杂交细胞B只存在1号染色体,其表达出酶Ⅰ、Ⅲ,说明编码酶Ⅰ的基因位于1号染色体上;杂交细胞A中只存在2号染色体,但表达出酶Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ,而杂交细胞B只存在1号染色体,也能表达出酶Ⅲ,说明编码酶Ⅱ和Ⅳ的基因位于2号染色体上.
故答案为:
(1)动物细胞融合动物细胞培养
(2)10 PEG(或灭活病毒)
(3)多(双)核细胞有丝分裂
(4)选择 36.5±0.5 除去成纤维细胞
(5)1Ⅱ和Ⅳ
点评 本题结合图标,考查动物细胞工程的相关知识,要求考生识记动物细胞培养的过程及条件;识记动物细胞融合的手段及其应用,能结合图中和表中信息准确答题,属于考纲识记和理解层次的考查.
| A. | 乙、丙细胞中都不含有染色单体 | |
| B. | 甲、丁细胞都可称为初级精母细胞 | |
| C. | 丁细胞中染色体的互换区段内,同一位点上的基因不相同 | |
| D. | 如对卵巢切片进行显微观察,无法看到和乙细胞特征相同的细胞 |
| A. | 细胞核内mRNA合成的同时会与核糖体结合 | |
| B. | 次级精母细胞一定只含一个染色体组 | |
| C. | 线粒体中不存在分解葡萄糖的酶 | |
| D. | 核糖体是蛋白质合成和加工的主要场所 |
| A. | B. | ||||
| C. | D. |
| A. | 若A蛋白与细胞间的相互粘连有关,则在动物细胞工程中常用胰蛋白酶处理组织碎块,使细胞分散开 | |
| B. | 若B蛋白与物质跨膜运输有关,且转运过程不消耗ATP,则转运方式为协助扩散 | |
| C. | 若C蛋白只能与特定分子结合,结合后引起细胞内一系列变化,则C蛋白是细胞膜完成信息交流的分子基础 | |
| D. | 若E蛋白具有催化功能,则其只能与一种物质结合,功能特征表现为专一性的特点 |
| A. | 一种氨基酸可由一种或几种特定的tRNA将它转运到核糖体上 | |
| B. | 一种tRNA可以携带几种结构相似的氨基酸 | |
| C. | 每种氨基酸都可由几种tRNA识别并转运 | |
| D. | 每种氨基酸只有一种tRNA识别并转运 |