题目内容
5．凝乳酶是奶酪生产中的关键性酶．直接利用动、植物生产凝乳酶受多种因素限制，培育高酶活力凝乳酶微生物菌种是目前最有前途的发展方向．用紫外线照射芽孢杆菌，分离、培养，并检测各菌株所产生的凝乳酶活力．操作过程如图1所示．请分析回答：
（1）图1的a过程目的是获得单一菌落（单菌落），b的接种方法为稀释涂布平板法．
（2）在一定温度下（35℃），一定时间内（ 通常为40分钟），凝固1mL10%脱脂奶粉的酶量为一个酶活力单位（U）．凝乳酶活力检测结果如图2所示．
①据图2所示，酶催化能力最强的是A6组．
②A2、A5组酶活力与A0组芽孢杆菌相同，有人对此做出了推测：A2、A5组芽孢杆菌虽发生了基因突变，但凝乳
酶蛋白未改变，其依据的理由是一种氨基酸可能对应多种密码子（或基因突变发生在非编码区）．为了验证上述假设，可采用DNA分子杂交技术检测凝乳酶基因是否发生了突变．
③将凝乳酶催化能力最强的菌株分离纯化后进行扩大化培养，尽管培养基成分合适、操作正确、培养温度和pH适宜，但凝乳酶的产量比预期偏低．对此，研究人员展开了讨论，认为还有其他因素，如培养时间，请设计一个实验方案对此因素进行探究（实验方案用表格的形式呈现）．
| 分组 | 1 | 2 | 3 | 4 | 5 |
| 培养时间（天） | 1 | 2 | 3 | 4 | 5 |
| 凝乳酶的产量（mg） |
分析 据图分析：图1所示的b过程为菌落的稀释，培养基中含有多种酶活力不同的突变芽孢杆菌．图2中，凝固1mL10%脱脂奶粉的酶量最少的是6组．
解答 解：（1）图1所示的b过程为菌落的稀释，目的是为获得单个菌落；b中的菌落均匀，所以b的接种方法为稀释涂布平板法．
（2）①据图2所示，凝固1mL10%脱脂奶粉的酶量最少的是A6组，故酶催化能力最强的是A6组．
②如果A2、A5组芽孢杆菌发生基因突变，但凝乳酶蛋白未改变，这可能是因为一种氨基酸可能对应多种密码子，随基因发生突变，但不会改变翻译出来的氨基酸；也可能是因为发生基因突变的区段为非编码区．为了验证上述的假设，可采用DNA分子杂交技术检测凝乳酶基因是否发生了突变．
③根据题意，可以设计自变量为培养时间，因变量为凝乳酶的产量，培养温度、pH、培养基等条件为无关变量进行实验．具体的表格见答案．
故答案为：
（1）单一菌落（单菌落） 稀释涂布平板法
（2）①A6
②一种氨基酸可能对应多种密码子（或基因突变发生在非编码区） DNA分子杂交
③培养时间
| 分 组 | 1 | 2 | 3 | 4 | 5 |
| 培养时间（天） | 1 | 2 | 3 | 4 | 5 |
| 凝乳酶的产量（mg） |
点评 本题结合图示主要考查基因工程的原理及技术基因工程的应用、蛋白质工程及实验的设计，意在强化相关知识的识记、理解与运用．
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15．下列有关内环境的叙述，正确的是（ ）
| A． | 抗利尿激素由垂体产生和释放 | |
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16．下列有关生物学实验的叙述中，正确的是（ ）
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| C． | 低温诱导染色体加倍实验中，盐酸酒精混合液可以使洋葱根尖解离 | |
| D． | 观察蝗虫精母细胞减数分裂实验过程中细胞始终保持生活状态 |
13．酶、激素、神经递质共有的特征是（ ）
| A． | 都属于蛋白质 | B． | 都是信号分子 | ||
| C． | 都必须与特定的分子结合 | D． | 作用后均失活 |
20．如图为利用人成纤维细胞（具分裂能力、能在HAT培养基上存活）和小鼠骨髓瘤细胞（具分裂能力、不能在HAT培养基上存活）进行人类基因定位的操作示意图，请回答相关问题．
（1）图示方法是动物细胞融合技术的应用，该技术的基础是动物细胞培养技术．
（2）操作所用的成纤维细胞应传代10代以内，诱导融合时需要加入的促融剂是PEG（或灭活病毒）．
（3）人、鼠细胞先经过细胞膜融合形成，再经过一次多（双）核细胞有丝分裂，形成单核细胞．
（4）HAT培养基起选择培养作用，培养时温度应为36.5±0.5℃，操作中加入乌本苷的目的是除去成纤维细胞．
（5）下表所示为杂交细胞A、B、C、D中存在的人类染色体及人类特有的4种酶（+表示存在，-表示不存在），这4种酶均为单基因编码产生，据表推断，编码酶Ⅰ的基因位于1染色体上，编码酶Ⅱ和Ⅳ的基因位于染色体2上．
（1）图示方法是动物细胞融合技术的应用，该技术的基础是动物细胞培养技术．
（2）操作所用的成纤维细胞应传代10代以内，诱导融合时需要加入的促融剂是PEG（或灭活病毒）．
（3）人、鼠细胞先经过细胞膜融合形成，再经过一次多（双）核细胞有丝分裂，形成单核细胞．
（4）HAT培养基起选择培养作用，培养时温度应为36.5±0.5℃，操作中加入乌本苷的目的是除去成纤维细胞．
（5）下表所示为杂交细胞A、B、C、D中存在的人类染色体及人类特有的4种酶（+表示存在，-表示不存在），这4种酶均为单基因编码产生，据表推断，编码酶Ⅰ的基因位于1染色体上，编码酶Ⅱ和Ⅳ的基因位于染色体2上．
| 杂交细胞 | 酶 | 人类染色体 | |||||
| Ⅰ | Ⅱ | Ⅲ | Ⅳ | 1 | 2 | 3 | |
| A | - | + | + | + | - | + | - |
| B | + | - | + | - | + | - | - |
| C | - | - | - | - | - | - | + |
| D | + | + | - | + | + | + | + |
10．心房颤动（房颤）是临床上最常见并且危害严重的心律失常疾病．最新研究表明，核孔复合物的运输障碍（核孔复合物是位于核孔上与核孔的结构和功能密切相关的物质）是导致心房颤动（房颤）的主要原因．据此分析正确的是（ ）
| A． | 核膜由两层磷脂分子组成，房颤的成因可能与mRNA不能进入细胞质有关 | |
| B． | 人体成熟的红细胞中核孔数目很少，一般不发生核孔运输障碍 | |
| C． | 核孔运输障碍发生的根本原因可能是编码核孔复合物的基因发生突变所致 | |
| D． | 蛋白质、DNA等大分子物质进出细胞核与核孔复合物有关 |
17．蝴蝶属于ZW型性别决定的生物．某种蝴蝶翅色由基因ab、ah、ay、a+、a控制的，前者对后者完全显性且基因位于常染色体上，翅色与相应基因型如表所示．请分析作答：
（1）对种群中所有墨翅蝶与墨翅蝶的杂交进行研究，发现子代中墨翅蝶总是占$\frac{2}{3}$．出现该现象最可能的原因是abab的受精卵不能发育（或致死），由此推断墨翅蝶的基因型有4种，种群中ab的频率变化为变小．
（2）某基因型的黄翅蝶与不同基因型的红翅蝶杂交，子代有红翅、黄翅和绿翅三种类型．亲本黄翅蝶的细胞中ay最多有2个．子代中出现了一只一侧为雌性一侧为雄性的“阴阳蝶”，这是染色体数目变异的结果，该变异发生在细胞的有丝分裂（填分裂方式）过程中．
（3）蝴蝶的白眼和绿眼是由D与d基因控制的一对相对性状．纯种红翅白眼雄蝶与纯种白翅绿眼雌蝶杂交（正交），F1全为红翅绿眼蝶，反交的结果与之相同．有学者认为纯种的白翅绿眼雌蝶的基因型有aaDD或aaZDWD两种可能，为确定D（d）基因位于什么染色体上，应选用纯种的基因型为ZdZd的个体与正交子代中的雌性（雌性、雄性）个体杂交，若F2表现为雄蝶全是白眼，雌蝶全是绿眼，说明D（d）位于性染色体上．
| 翅色 | 墨色 | 红色 | 黄色 | 绿色 | 白色 |
| 基因型 | ab | ah | ay | a+ | aa |
（2）某基因型的黄翅蝶与不同基因型的红翅蝶杂交，子代有红翅、黄翅和绿翅三种类型．亲本黄翅蝶的细胞中ay最多有2个．子代中出现了一只一侧为雌性一侧为雄性的“阴阳蝶”，这是染色体数目变异的结果，该变异发生在细胞的有丝分裂（填分裂方式）过程中．
（3）蝴蝶的白眼和绿眼是由D与d基因控制的一对相对性状．纯种红翅白眼雄蝶与纯种白翅绿眼雌蝶杂交（正交），F1全为红翅绿眼蝶，反交的结果与之相同．有学者认为纯种的白翅绿眼雌蝶的基因型有aaDD或aaZDWD两种可能，为确定D（d）基因位于什么染色体上，应选用纯种的基因型为ZdZd的个体与正交子代中的雌性（雌性、雄性）个体杂交，若F2表现为雄蝶全是白眼，雌蝶全是绿眼，说明D（d）位于性染色体上．
请分析回答下列生物技术方面的问题：