Question

10．叶绿体转基因技术是将外源基因整合到叶绿体基因组中，该技术能有效改良植物的品质．请回答：
（1）转基因技术的核心步骤是构建基因表达载体，完成该步骤所需要的酶有限制酶和DNA连接酶．
（2）将植物体细胞处理得到原生质体，再通过农杆菌转化或基因枪法，将目的基因导入原生质体，使原生质体再生细胞壁之后，通过植物组织培养 技术培养可得到相应的转基因幼苗．
（3）来自原核生物中有重要价值的外源基因，无需改造和修饰就可在叶绿体中高效表达，就此分析，原因是叶绿体DNA和与原核生物DNA结构类似（由于叶绿体大多数基因的结构、转录与翻译系统均与原核生物类似）．
（4）对大多数高等植物而言，与传统的细胞核转基因相比，叶绿体转基因更稳定，其遗传方式不遵循（答“遵循”或“不遵循”）分离定律，不会随花粉（“花粉”或“卵细胞”）传给后代，从而保持了母本（“父本”或“母本”的遗传特性．

Answer 1

分析 1、基因工程的基本操作步骤主要包括四步：①目的基因的获取；②基因表达载体的构建；③将目的基因导入受体细胞；④目的基因的检测与鉴定．
2、将目的基因导入植物细胞：采用最多的方法是 农杆菌转化法，其次还有基因枪法和 花粉管通道法等．
3、细胞质遗传，后代具有母系遗传特点，后代不会出现一定比例的性状分离比．

解答 解：（1）转基因技术的核心步骤是构建基因表达载体，此过程需要用同一种限制酶切割目的基因和运载体，使它们露出相同的末端，再用DNA连接酶连接目的基因和运载体．
（2）如果受体细胞植物细胞，常用农杆菌转化法、基因枪法或花粉管通道法，将目的基因导入受体细胞中，之后用植物组织培养技术将含有目的基因的受体细胞培育成相应的转基因幼苗．
（3）由于叶绿体DNA和与原核生物DNA结构类似或由于叶绿体大多数基因的结构、转录与翻译系统均与原核生物类似，因此来自原核生物中有重要价值的外源基因，无需改造和修饰就可在叶绿体中高效表达．
（4）叶绿体转基因是属于细胞质遗传，具有母系遗传特点．而基因分离定律是细胞核遗传，因此不遵循基因分离定律．花粉中细胞质较少，受精卵中细胞质几乎来之卵细胞的，因此叶绿体转基因不会随着花粉遗传给后代．
故答案为：
（1）构建基因表达载体       限制酶和DNA连接酶
（2）农杆菌转化     基因枪      植物组织培养
（3）叶绿体DNA和与原核生物DNA结构类似（由于叶绿体大多数基因的结构、转录与翻译系统均与原核生物类似 ）
（4）不遵循   花粉   母本

点评 本题综合考查基因工程技术的有关知识，要求考生识记基因工程的原理、使用工具、操作步骤及应用，难度适中．