Question

（15分）人和哺乳动物的尿中含有尿素，大量尿素的存在会对环境造成污染。土壤中有些细菌含有脲酶，可通过降解尿素作为其生长的氮源。现对土壤中的这类细菌进行分离实验，请回答下列问题：

（1）分离培养细菌时必须进行无菌操作，包括培养基和各种器皿都必须是无菌的，常用的灭菌方法有 (至少答2种)。

（2）将样液进行一系列的梯度稀释，然后接种培养。在稀释土壤溶液的过程中每一步都要在 旁进行操作。接种后的培养皿 于37℃的 中培养。

（3）用含有酚红指示剂的培养基筛选能分泌脲酶的细菌，从功能上划分该培养基属于 培养基。若培养基中存在有分解尿素的细菌，其菌落周围会出现红色环带，这是由于尿素被分解产生的 使pH升高，酚红指示剂产生的颜色变化，从而证明这一菌株可以尿素为氮源。变色区域越大，表明该菌株利用尿素的能力 。

（4）与全营养培养基中的菌落相比，以尿素为氮源的培养基中菌落数 。

A．多 B．少 C．相等 D．几乎为零

Answer 1

（1）高压蒸汽灭菌 灼烧灭菌 干热灭菌 (2)酒精灯火焰旁 倒置 恒温培养箱 (3)选择 氨 越强 (4) B

【解析】

试题分析：（1）常用的灭菌方法有高压蒸汽灭菌、灼烧灭菌、干热灭菌。

（2）在稀释土壤溶液的过程中每一步都要在酒精灯火焰旁进行操作，避免周围环境微生物的污染。接种后的培养皿倒置培养能够防止凝结在皿盖上的水蒸气流到培养基表面导致染菌，还有利于菌种利用培养基营养，加快生长速度。37℃恒温有利菌种生长。

（3）含有酚红指示剂的培养基筛选能分泌脲酶的细菌，为选择培养基。分解尿素的细菌能够将尿素分解产生氨使pH升高，酚红指示剂变红色。变色区域越大，表明生成的氨越多，该菌株利用尿素的能力越强。

（4）其他微生物一般以蛋白胨为氮源，不能在以尿素为氮源的培养基生存，故与全营养培养基中的菌落相比，以尿素为氮源的培养基中菌落数较少。

考点：本题考查微生物的培养和分离相关知识，意在考查考生能理解所学知识的要点，把握知识间的内在联系，形成知识的网络结构能力。