题目内容
12．现有金黄色的葡萄球菌、硝化细菌和圆褐固氮菌3种细菌的混合物，某研究性学习小组的同学拟通过下面的实验把它们分离开，并获得纯种，请完善下列实验方案并回答相关问题．（1）实验步骤：
①配制三种固体培养基A、B、C，分别控制A加入高浓度的食盐；B无氮源；C无有机碳源，其他条件均满足生长要求，将这三种培养基分别分成两份，依次标上A1和A2、B1和B2、C1和C2．
②在培养基A1、B1、C1中分别接种三种细菌的混合物，放在适宜的条件下培养3～4d．
③挑取A1、B1、C1上的正常生长的菌落中的菌，分别接种在培养基A2、B2、C2上，放在适宜的条件下培养3～4d．
（2）结果预测：
在A1培养基上存活的是金黄色葡萄球菌，在B1培养基上存活的是圆褐固氮菌，在C1培养基上存活的是硝化细菌．
（3）实验步骤③的目的是对分离的菌种进一步纯化．
分析 筛选和分离微生物需要使用选择培养基．金黄色葡萄球菌属于耐盐细菌，可以用含高浓度的氯化钠的选择培养基筛选，硝化细菌属于化能自养型细菌，可以用含氨的而不含碳源的培养基筛选，圆褐固氮菌属于自生固氮菌，可以用不含氮源的选择培养基进行筛选．生物实验遵循的一般原则主要有对照原则、等量原则、单一变量原则和控制无关变量原则等．据此分析作答．
解答 解：（1）实验步骤：①根据三种微生物的特点分别配置A、B、C加入高浓度的食盐、无氮源和无有机碳源的选择培养基．其他条件均满足生长要求，将这三种培养基分别分成两份，依次标上A1和A2、B1和B2、C1和C2．
②根据题意，在培养基A1、B1、C1中分别接种三种细菌的混合物进行选择培养，放在适宜的条件下培养3～4d．
（2）结果预测：金黄色葡萄球菌属于耐盐细菌，能够在A1培养基上存活；圆褐固氮菌属于自生固氮菌，能够在B1培养基上存活；硝化细菌属于化能自养型细菌，能够在C1培养基上存活．
（3）实验步骤③的目的是对筛选分离的菌种进行进一步纯化．
故答案为：
（1）①加入高浓度的食盐 无氮源 无有机碳源
②三种细菌的混合物
（2）金黄色葡萄球菌 圆褐固氮菌 硝化细菌
（3）对分离的菌种进一步纯化
点评 本题通过实验主要考查微生物的筛选与分离，意在强化学生对相关微生物的特点的识记与微生物的筛选及实验的分析的理解与掌握．题目难度中等．
练习册系列答案
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4．（1）限制酶是基因工程必需的工具酶，其特性是一种限制酶只能识别一种特定的核苷酸序列．
（2）如图1所示的酶M和酶N是两种限制酶，图中DNA片段只注明了黏性末端处的碱基种类，其它碱基的种类未作注明．
（3）酶M特异性剪切的DNA片段是
，则酶N特异性剪切的DNA片段是
．
（4）多个片段乙和多个片段丁混合在一起，用DNA连接酶拼接得到环状DNA，其中只由两个DNA片段连接成的环状DNA分子有3种．
（5）如图2的A和B分别表示两段DNA序列．表格分别表示4种限制性核酸内切酶的酶切位点．
（6）据图2：假设位于EPSPS基因两侧的DNA序列均如图2中A所示，则应选择表格中酶2进行酶切；若位于EPSPS基因两侧的DNA序列分别如图2中A和B所示，则应选择表中酶2和3进行酶切．
（7）假设大肠杆菌突变菌株甲中EPSPS基因的右侧序列如图2中B所示，请在图3方框内画出经酶切后产生的两个末端的碱基序列．
．
（2）如图1所示的酶M和酶N是两种限制酶，图中DNA片段只注明了黏性末端处的碱基种类，其它碱基的种类未作注明．
（3）酶M特异性剪切的DNA片段是
，则酶N特异性剪切的DNA片段是．（4）多个片段乙和多个片段丁混合在一起，用DNA连接酶拼接得到环状DNA，其中只由两个DNA片段连接成的环状DNA分子有3种．
（5）如图2的A和B分别表示两段DNA序列．表格分别表示4种限制性核酸内切酶的酶切位点．
| 酶的种类 | 1 | 2 | 3 | 4 |
| 酶切位点 |  |  |  |  |
（7）假设大肠杆菌突变菌株甲中EPSPS基因的右侧序列如图2中B所示，请在图3方框内画出经酶切后产生的两个末端的碱基序列．
．
1．
据图分析，下列选项中遵循基因自由组合定律的是（ ）
据图分析，下列选项中遵循基因自由组合定律的是（ ）| A． |  | B． |  | ||
| C． |  | D． |  |