Question

如图表示运用基因工程技术生产胰岛素的三种途径，据图请回答：

（1）为了便于将含目的基因的细胞筛选出来，所选择的重组质粒上应该具有

 

．构成重组质粒M时，通常要用

 

分别切割

 

和

 

．
（2）培养转基因羊的过程整，科研人员通过

 

技术将重组质粒M转移到受体A中，受体A应该是

 

．
（3）蜗居为双子叶植物，过程②常用的方法是

 

，④过程常采用的技术室

 

．
（4）过程⑤常采用

 

处理大肠杆菌，使之成为

 

细胞，利于完成转化过程．

Answer 1

考点：基因工程的原理及技术

专题：

分析：基因工程技术的基本步骤：
（1）目的基因的获取：方法有从基因文库中获取、利用PCR技术扩增和人工合成．
（2）基因表达载体的构建：是基因工程的核心步骤，基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子和标记基因等．
（3）将目的基因导入受体细胞：根据受体细胞不同，导入的方法也不一样．将目的基因导入植物细胞的方法有农杆菌转化法、基因枪法和花粉管通道法；将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法；将目的基因导入微生物细胞的方法是感受态细胞法．
（4）目的基因的检测与鉴定：分子水平上的检测：①检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因--DNA分子杂交技术；②检测目的基因是否转录出了mRNA--分子杂交技术；③检测目的基因是否翻译成蛋白质--抗原-抗体杂交技术．个体水平上的鉴定：抗虫鉴定、抗病鉴定、活性鉴定等．

解答： 解：（1）为了便于将含目的基因的细胞筛选出来，所选择的重组质粒上应该具有标记基因．构成重组质粒M时，通常要用（同种）限制性核酸内切酶分别切割含目的基因的DNA片段和质粒，再用DNA连接酶将目的基因和质粒连接形成重组质粒．
（2）将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法；由于受精卵的全能性最高，因此培育转基因动物时，应以受精卵作为受体细胞．
（3）将目的基因导入植物细胞最常用的方法是农杆菌转化法；将转基因植物细胞培育成转基因植株还需要采用植物组织培养技术．
（4）将目的基因导入微生物细胞常用感受态细胞法，即用Ca²⁺（或CaCl₂）处理大肠杆菌，使之成为感受态细胞，利于完成转化过程．
故答案为：
（1）标记基因    （同种）限制性核酸内切酶   含目的基因的DNA片段    质粒
（2）显微注射   受精卵
（3）农杆菌转化法    植物组织培养
（4）Ca²⁺（或CaCl₂）     感受态

点评：本题结合图解，考查基因工程的相关知识，要求考生识记基因工程的操作工具及具体的操作步骤，掌握各步骤中的相关细节，能结合图中信息准确答题，属于考纲识记和理解层次的考查．