题目内容

【题目】甲、乙两同学学习完微生物的实验室培养与分离后,要利用所学知识研究环境中微生物的情况。请回答相关问题:

Ⅰ.甲同学为了检测饮用水中是否会有某种细菌,配制如下培养基进行培养:

蛋白胨

10 g

乳糖

5 g

蔗糖

5 g

K2HPO4

2 g

蒸馏水

1000 mL

将pH调到7.2

(1)该培养基所含有的碳源有___________;培养基的制备包括计算、称量、溶化、灭菌、倒平板,最后一步待培养基冷却至______左右时,在_________火焰附近倒平板。

(2)在微生物培养操作过程中,为防止杂菌污染,需对培养基和培养器皿进行______(“消毒”或“灭菌”);操作者的双手需进行清洁和________(“消毒”或“灭菌”)。

(3)对获得的菌种可以依据菌落的 _________________特征对细菌进行初步的鉴定。

Ⅱ.乙同学是从土壤中分离分解尿素细菌的相关实验。

(1)在培养基中加入______指示剂,可初步鉴定出该种细菌是否分解尿素。

(2)为了尽快观察到细菌培养的实验结果,应将接种后的培养基倒置于_____________中培养。要使该实验所得结果可靠,还应该同时在另一平板上接种等量的_______作为对照进行实验。

(3)该同学利用 _____________法统计土壤样品中尿素分解菌的菌落数时,1g样品被稀释106倍后,每个严格灭菌的培养皿中用了0.5ml稀释液,最终所用的5个培养皿所得的菌落数分别是112、132、141、130、140,则每克样品中的菌株数为_______________。

【答案】 蔗糖、乳糖和蛋白胨 50℃ 酒精灯 灭菌 消毒 形状、大小、颜色和隆起程度等 酚红 恒温培养箱 无菌水 稀释涂布平板法 2.62×108

【解析】【试题分析】

本题考查微生物的培养和分离计数的相关知识。题目比较简单,解题思路是根据题意梳理相关基础知识,然后结合题目要求分析作答即可。

Ⅰ. (1)由表格内容可知,该培养基的碳源主要是乳糖、蔗糖,蛋白胨做为主要的氮源也能提供碳源;培养基的制备包括计算、称量、溶化、灭菌、倒平板,最后一步待培养基冷却至50℃左右时,在酒精灯火焰附近倒平板。

(2)消毒是指使用较为温和的物理或化学方法杀死物体表面或内部的部分微生物(不包括芽孢和孢子)。灭菌则是指使用强烈的理化因素杀死物体内外所有的微生物,包括芽孢和孢子。在微生物培养操作过程中,为防止杂菌污染,需对培养基和培养器皿进行灭菌;操作者的双手需进行清洁和消毒。

(3) 当单个或少数细菌在固体培养基上大量繁殖时,便会形成一个肉眼可见的、具有一定形态结构的子细胞群体,称为菌落。每种细菌在一定条件下形成的菌落,可以作为菌种鉴定的重要依据。因此,对获得的菌种可以依据菌落的形状、大小、颜色和隆起程度等特征对细菌进行初步的鉴定。

Ⅱ. (1)在细菌分解尿素的反应中,细菌产生的脲酶可将尿素分解成为氨。为证明分离得到的细菌是否可以分解尿素,可在培养基中加入酚红指示剂,若该指示剂变红,则可初步鉴定该细菌可以分解尿素。

(2)要想使微生物快速地繁殖,就要置于适宜的条件下,特别是温度,所以要将接种后的培养基倒置于恒温培养箱中培养;要使该实验所得结果可靠,还应该同时在另一平板上接种等量的无菌水作为对照进行实验。

(3)常用稀释涂布平板法来统计样品中的活菌数。每克样品中的菌株数=(C÷V)×M,其中C代表某一稀释度下平板上生长的平均菌落数,本实验中的C=(112+132+141+130+140)÷5=131,V代表涂布平板时所用的稀释液的体积,本实验中的V=0.5mL,M代表稀释倍数,本实验中的M=106,因此,每克样品中的菌株数为(131÷0.5)×106=2.62×108。

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