Question

18．动物器官的体外培养技术对于研究器官的生理、病理过程及其机制意义重大．图是一个新生小鼠的肝脏小块培养装置示意图．请回答下列问题．
（1）肝脏切成小薄片，这有利于肝脏细胞吸收氧气和营养物质、排出代谢废物．
（2）气室中充入5% C0₂气体的主要作用是维持培养液适宜的pH．
（3）培养液中添加抗生素是为了抑制细菌生长，但要注意选择抗生素的种类和剂量，以保证抗生素对肝脏无害．
（4）有机物X有毒性，可诱发染色体断裂．利用上图所示装置和提供的下列材料用具，探究肝脏小块对有机物X是否具有解毒作用．
材料用具：肝脏小块，外周血淋巴细胞，淋巴细胞培养液，植物凝集素（刺激淋巴细胞分裂）；显微镜，载玻片，盖玻片，玻璃皿，滴管；吉姆萨染液（使染色体着色），有机物X溶液等．
实验过程：
①在淋巴细胞培养液中加入植物凝集素培养淋巴细胞，取4等份，备用．
②利用甲、乙、丙、丁4组如图所示装置，按如表步骤操作（“√”表示已完成的步骤）．

	甲	乙	丙	丁
步骤一：加人肝脏培养液	√	√	√	√
步骤二：加入有机物X溶液	√		√
步骤三：放置肝脏小块	√

上表中还需进行的操作是向乙（或丁）组装置中放置肝脏小块．
③培养一段时间后，取4组装置中的等量培养液，分别添加到4份备用的淋巴细胞培养液中继续培养．
④一段时间后取淋巴细胞分别染色、制片．在显微镜下观察染色体形态和数量，并对比分析．若丙组淋巴细胞出现异常，而甲组的淋巴细胞正常，则说明肝脏小块对有机物X具有解毒作用．

Answer 1

分析 1、动物细胞培养的条件：
（1）无菌、无毒的环境：①消毒、灭菌；②添加一定量的抗生素；③定期更换培养液，以清除代谢废物．
（2）营养物质：糖、氨基酸、促生长因子、无机盐、微量元素等，还需加入血清、血浆等天然物质．
（3）温度和PH．
（4）气体环境：95%空气（细胞代谢必需的）和5%的CO₂（维持培养液的PH）．
2、肝脏切成小薄片可以增大与外界环境的接触面积；抗生素可以杀菌；对照实验要遵循单一变量原则．

解答 解：（1）把肝脏切成小薄片，有利于肝脏细胞的呼吸代谢，即吸收氧气和营养物质、排出代谢废物．
（2）气室中充入5% CO₂的作用是维持培养液适宜的pH．
（3）为了防止杂菌的生长，可在培养基中添加适量的抗生素，但要注意选择抗生素的种类和剂量，以保证抗生素对肝脏无害．
（4）为了排除是肝脏培养液或是肝脏小块对实验的影响，应向乙或丁装置中放置肝脏小块；由题目中古姆萨染液（使染色体着色），应该是观察染色体的形态和数目；为有机物X对淋巴细胞的毒害作用，当出现丙异常，甲乙丁正常，说明对细胞的毒害是物质X引起的，同时加入肝脏小块和X时，细胞正常，说明肝脏小块对有机物X有解毒作用．
故答案为：
 （1）吸收氧气和营养物质、排出代谢废物
（2）维持培养液适宜的pH
（3）种类和剂量
（4）②向乙（或丁）组装置中放置肝脏小块
④染色体形态和数量         肝脏小块对有机物X具有解毒作用

点评 本题结合探究实验，考查动物细胞培养的相关知识，要求考生识记动物细胞培养的过程及条件；明确实验的目的，能根据实验原则完善实验步骤，并能根据实验现象得出正确的实验结论．