Question

18．为了调查某河流的水质状况，某研究小组测定了该河流水样中的细菌含量，并进行了细菌分离等工作．回答下列问题：
（1）该小组采用稀释涂布平板法检测水样中细菌含量．在涂布接种前，为了检测培养基灭菌是否彻底，随机取若干灭菌后的空白/未接种平板放在恒温培养箱中先行培养了一段时间；然后，将1mL水样稀释 100倍，在3个平板上用涂布法分别接入0.1mL稀释液；经适当培养后，3个平板上的菌落数分别为39、38和37，据此可得出每升水样中的活菌数为3.8×10⁷个．
（2）该小组采用平板划线法分离水样中的细菌，操作时，接种环通过灼烧灭菌，在第二次及以后的划线时，总是从上一次划线的末端开始划线，这样做的目的是将聚集的菌体逐步稀释以便获得单个菌落．
（3）示意图A和B中，B表示的是用稀释涂布平板法接种培养后得到的结果，另外一个图表示的接种方法在操作时需要用到的工具是接种环．
（4）如果想要检测河水中是否存在大肠杆菌，需在伊红美蓝培养基上进行培养，若存在大肠杆菌，则菌落呈现黑色，那么从功能上来讲，该培养基属于鉴别培养基．
（5）该小组将得到的菌株接种到液体培养基中并混匀，一部分进行静置培养，另一部分进行振荡培养，结果发现：振荡培养的细菌比静置培养的细菌生长速度快．分析其原因是：振荡培养能提高培养液中溶解氧的含量．

Answer 1

分析 分析图解：图中细菌的分离的方法为①表示平板划线法，②表示稀释涂布平板法．
①平板划线法：将已经熔化的培养基倒入培养皿制成平板，接种，划线，在恒温箱里培养．在线的开始部分，微生物往往连在一起生长，随着线的延伸，菌数逐渐减少，最后可能形成单个菌落．
②稀释涂布平板法：将待分离的菌液经过大量稀释后，均匀涂布在培养皿表面，经培养后可形成单个菌落．

解答 解：（1）微生物培养过程应该进行无菌操作，配制的培养基要进行高压蒸汽灭菌，可以将灭菌后的空白平板进行培养以检测培养基灭菌是否彻底；由题意知1ml水样中的菌落数是（39+38+37）÷3÷0.1×100=3.8×10⁴个，每升水样中的活菌数为3.8×10⁴×10³=3.8xl0⁷个/L．
（2）对接种环常用的灭菌方法是灼烧灭菌；在第二次及以后的划线时，总是从上一次划线的末端开始划线的目的是：将聚集的菌体逐渐稀释分散以便获得由单个细胞繁殖而来的菌落．
（3）分析题图可知，A培养皿采用的接种方法是平板划线法，B培养皿采用的接种方法是稀释涂布平板法．平板划线时需要利用接种环进行接种．
（4）如果想要检测河水中是否存在大肠杆菌，需在伊红美蓝培养基上进行培养，若存在大肠杆菌，则菌落呈现黑色，那么从功能上来讲，该培养基属于鉴别培养基．
（5）由题意可知，振荡培养比静置培养的细菌生长速度快，由此可以说明该细菌是需氧菌，由于振荡培养提高了培养液中溶解氧的含量，同时可使菌体与培养液充分接触，提高营养物质的利用率，细菌生长速度加快．
故答案为：
（1）空白/未接种    3.8×10⁷
（2）灼烧   将聚集的菌体逐步稀释以便获得单个菌落
（3）B   接种环
（4）黑    鉴别
（5）快     提高     溶解氧

点评 本题主要考查培养基的制作和微生物的接种方法，意在强化学生对实验室的微生物的培养的相关知识的理解与掌握．