Question

3．科学家将鱼的抗冻蛋白基因转入番茄，使番茄的耐寒能力大大提高．回 答下列相关问题：
（1）在该过程中，研究人员首先获取目的基因，并采用PCR技术対目的基因进行扩增，该技术需要的条件是：引物、Taq酶、原料和模板．
（2）为了在番茄中获得抗冻蛋白必须将抗冻蛋白基因连接在质粒中的启动子之后．基因工程核心步骤的名称是基因表达载体的构建．
（3）研究人员通常采用农杆菌转化法将鱼的抗冻蛋白基因导入番茄细胞内，通常采用抗原-抗体杂交技术，在分子水平检测目的基因是否翻译成了相应的蛋白质．

Answer 1

分析 基因工程技术的基本步骤：
（1）目的基因的获取：方法有从基因文库中获取、利用PCR技术扩增和人工合成．
（2）基因表达载体的构建：是基因工程的核心步骤，基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子和标记基因等．
（3）将目的基因导入受体细胞：根据受体细胞不同，导入的方法也不一样．将目的基因导入植物细胞的方法有农杆菌转化法、基因枪法和花粉管通道法；将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法；将目的基因导入微生物细胞的方法是感受态细胞法．
（4）目的基因的检测与鉴定：分子水平上的检测：①检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因--DNA分子杂交技术；②检测目的基因是否转录出了mRNA--分子杂交技术；③检测目的基因是否翻译成蛋白质--抗原-抗体杂交技术．个体水平上的鉴定：抗虫鉴定、抗病鉴定、活性鉴定等．

解答 解：（1）体外扩增目的基因可采用PCR技术；该技术需要的条件是：引物、Taq酶、原料（四种脱氧核苷酸）和模板（DNA的两条链）．
（2）抗冻蛋白是由抗冻蛋白基因表达产生的，而基因表达包括转录和翻译两个过程，其中转录过程需要启动子启动．因此，为了在番茄中获得抗冻蛋白必须将抗冻蛋白基因连接在质粒中的启动子之后．基因工程核心步骤是基因表达载体的构建．
（3）将目的基因导入植物细胞常用农杆菌转化法．在分子水平上检测目的基因是否翻译成了相应的蛋白质，通常采用抗原-抗体杂交技术．
故答案为：
（1）PCR       引物   Taq酶    模板
（2）启动子    基因表达载体的构建
（3）农杆菌转化   抗原-抗体杂交

点评 本题考查基因工程的相关知识，要求考生识记基因工程的原理、操作步骤，掌握各操作步骤中需要注意的细节，能结合所学的知识准确答题，属于考纲识记层次的考查．