题目内容

1．大肠杆菌是寄生于人和动物肠道中的细菌，是一种常用的生物学实验材料，其代谢产物能与染料伊红美蓝反应，使菌落呈黑色．
（1）如表是某公司研发的一种培养大肠杆菌菌群的培养基配方．
 成分含量 
 蛋白胨 10.0g
 乳糖5.0g
 蔗糖5.0g
 K2HPO4 2.0g
 显色剂 0.2g
 琼脂 12.0g
将上述物质溶解后，用蒸馏水定容到1000mL 
根据用途划分，该培养基属于鉴别（填“选择”或“鉴别”）培养基，若要分离能分解尿素的细菌需将培养基中蛋白胨换成尿素，若要鉴定分解尿素的细菌还需将伊红•美蓝换成酚红指示剂．
（2）培养大肠杆菌时，常用的接种方法是平板划线法和稀释涂布平板法．
（3）培养大肠杆菌时，在接种前通常需要检测培养基是否被污染．对于固体培养基应采用的检测方法是将未接种的培养基在适宜的温度下放置适宜的时间，观察培养基上是否有菌落产生．对已使用过的培养基及其培养物必须经过灭菌处理后才能丢弃，以防止培养物的扩散．
（4）现有一升水样，用无菌吸管吸取1mL水样至盛有9mL无菌水的试管中，依次稀释103稀释度．各取0.1mL已稀释103倍的水样分别接种到三个培养基上培养，记录的菌落数分别为55、56、57，则每升原水样中大肠杆菌数为5.6×108．
（5）为检测严重污染水体中大肠杆菌数量，将水样适当稀释后，取样涂布在上述平板培养基中，应选择颜色为黑色的菌落进行计数．该方法是通过统计平板上的菌落数来推测样品中的活菌数，其原理是当样品的稀释度足够高时，培养基表面生长的一个菌落来源于样品稀释液中的一个活菌．

分析 1、微生物培养基一般都含有水、碳源、氮源、无机盐，此外还要满足微生物生长对pH、特殊营养物质以及氧气的要求．
2、鉴别、培养大肠杆菌可使用伊红-美蓝培养基，菌落呈黑色或紫黑色有金属光泽．
3、由于细菌分解在尿素的过程中合成脲酶，脲酶将尿素分解成氨，会使培养基碱性增强，PH升高，所以可以用检测pH的变化的方法来判断尿素是否被分解，可在培养基中加入酚红指示剂，尿素被分解后产生氨，PH升高，指示剂变红．

解答 解：（1）分析培养基成分可知，培养基中加入显色剂，因此根据用途可以判断，该培养基属于鉴别培养基；培养基中的氮源为蛋白胨，若要分离能分解尿素的细菌需将培养基中蛋白胨换成尿素，若要鉴定分解尿素的细菌还需将伊红•美蓝换成酚红指示剂．
（2）培养大肠杆菌时，常用的接种方法是平板划线法和稀释涂布平板法．
（3）培养大肠杆菌时，在接种前通常需要检测培养基是否被污染．对于固体培养基应将未接种的培养基在适宜的温度下放置适宜的时间，观察培养基上是否有菌落产生．对已使用过的培养基及其培养物必须经过灭菌处理后才能丢弃，以防止培养物的扩散．
（4）根据题干提供的数据，每升原水样中大肠杆菌数=（55+56+57）÷3÷0.1×103×103=5.6×108．
（5）根据题意可知，“大肠杆菌代谢产物能与染料伊红美蓝反应，使菌落呈黑色”，因此为检测严重污染水体中大肠杆菌数量，将水样适当稀释后，取样涂布在上述平板培养基中，应选择颜色为黑色的菌落进行计数．该方法是通过统计平板上的菌落数来推测样品中的活菌数，其原理是当样品的稀释度足够高时，培养基表面生长的一个菌落来源于样品稀释液中的一个活菌．
故答案为：
（1）鉴别       蛋白胨      尿素        酚红指示剂
（2）平板划线法和稀释涂布平板法
（3）将未接种的培养基在适宜的温度下放置适宜的时间，观察培养基上是否有菌落产生   灭菌
（4）5.6×108
（5）黑色   当样品的稀释度足够高时，培养基表面生长的一个菌落来源于样品稀释液中的一个活菌

点评 本题考查了微生物分离与培养的有关知识，要求考生能够根据实验原理补充实验步骤，识记培养基的主要成分，掌握微生物分离与纯化的一般方法．

练习册系列答案
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9．植物各器官生长发育消耗的有机物都是通过叶肉细胞光合作用合成．研究人员在不同条件下，对某一时刻番茄叶肉细胞中叶绿素a和叶绿素b含量的比值、C3的最大消耗速率及有机物含量的影响进行了研究，实验结果如表所示（土壤含水量是指土壤最大含水量的百分比）．请回答下列问题：
光照强度土壤含水量（%）叶绿素a含量与叶绿素b含量的比值C3的最大消耗速率（μmol•m-2•s-1）有机物含量（g•L-1）
正常光804.4631.71.9
403.9725.41.6
弱光804.0711.21.2
403.7311.81.4
（1）叶肉细胞中的叶绿素a和叶绿素b分布在叶绿体类囊体薄膜上，在通过纸层析法分离色素时表中所列色素在滤纸条上形成的色素带依次呈蓝绿色和黄绿色色．
（2）据表中数据可知，弱光下叶肉细胞中叶绿素b（色素名称）的相对含量有所升高，但是C3的最大消耗速率却明显降低，究其原因是弱光下产生的[H]和ATP（填物质名称）减少限制了暗反应．
（3）当土壤含水量为40%时，植物表现为缺水，此时弱光条件下其叶肉细胞中的有机物含量反而多于土壤含水量为80%时，从水分供应对植物生理过程的影响角度分析，原因可能是土壤缺水对呼吸作用的影响大于对光合作用的影响．
（4）叶肉细胞的净光合作用强度等于光合作用合成的有机物的量减去叶肉细胞呼吸作用消耗的有机物量．表中所示有机物含量不等于 （填“等于”或“不等于”）叶肉细胞的净光合作用强度，理由是表中所示叶肉细胞中有机物是光合作用合成量减去细胞呼吸作用消耗量和运到其他器官后的量．
16．如图1为高等绿色植物光合作用图解，请据图作答．

（1）图中Ⅰ阶段必须在有光（填“有光”/“无光）条件下才能进行，故称为光反应阶段，该阶段进行的部位是类囊体薄膜．
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（5）图2表示植物光合作用与环境因素之间的关系，图2中B点表示光合作用速率与呼吸作用速率达到相等，当植物缺镁时，B点将右（左移/右移）．
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（3）某校生物兴趣小组为调查自来水水质，测定了自来水水样中的细菌含量：培养基灭菌后，将1mL水样稀释1000倍，在3个平板上用涂布法分别接入0.1mL稀释液，经适宜条件下培养后，3个平板上的菌落数分别为51、50和49．据此可得出每升水样中的活菌数为5.0×108个． 要使该实验所得结果可靠，还应该同时在另一平板上接种0.1ml（或等量）无菌水作为对照进行实验．
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