Question

12．某生物兴趣小组积极参加盛产苹果的贫困县精准扶贫的苹果酒、苹果醋建厂的调研项目．拟设计采用发酵罐开展苹果酒、醋生产的流程是：苹果泥制备→加料→接种→通气培养→密封发酵→灌装苹果酒、醋．
（1）制备高产果酒的酵母菌菌株：
①在秋季的葡萄园中，在葡萄成熟落地流出的果汁的周围土壤中酵母菌大量生长繁殖．取该处10g土样加入盛有90mL无菌生理盐水的锥形瓶中，充分摇匀．
②筛选高产果酒的酵母菌菌株，宜制备pH为酸性、添加有重络酸钾的选择培养基．为测定土壤中酵母菌的数量，一般选用10²、10³、10⁴倍稀释，用稀释涂布平板法接种上述所得酵母菌稀释液．在适宜条件下培养一段时间后，菌落周围灰绿色范围最大的，即是高产菌株．     
（2）苹果酒、苹果醋的生产：
①在用发酵罐生产的过程中，一般采用抽样检测方法，通过出料口地方对发酵液进行定期观察计数，以了解发酵情形．
②苹果醋生产可在苹果酒生产基础上改变菌种和发酵条件进行．
（3）评价生产的苹果酒、苹果醋优劣的最常用方法是嗅闻和品尝．

Answer 1

分析 1、参与果酒制作的微生物是酵母菌，其新陈代谢类型为异养兼性厌氧型．果酒制作的原理：
（1）在有氧条件下，反应式如下：C₆H₁₂O₆+6H₂O+6O₂$\stackrel{酶}{→}$6CO₂+12H₂O+能量；
（2）在无氧条件下，反应式如下：C₆H₁₂O₆$\stackrel{酶}{→}$2CO₂+2C₂H₅OH+能量．
2、参与果醋制作的微生物是醋酸菌，其新陈代谢类型是异养需氧型．果醋制作的原理：
当氧气、糖源都充足时，醋酸菌将葡萄汁中的果糖分解成醋酸．
当缺少糖源时，醋酸菌将乙醇变为乙醛，再将乙醛变为醋酸．

解答 解：（1）①在秋季的葡萄园中，在葡萄成熟落地流出的果汁的周围土壤中酵母菌大量生长繁殖．取该处10g土样加入盛有90mL无菌生理盐水的锥形瓶中，充分摇匀．
②酵母菌适宜生存在偏酸性环境中，并且酒精的鉴定在酸性条件下用重铬酸钾鉴定，因此筛选高产果酒的酵母菌菌株，宜制备pH为酸性、添加有重络酸钾的选择培养基．为测定土壤中酵母菌的数量，一般选用10²、10³、10⁴倍稀释，用稀释涂布平板法接种上述所得酵母菌稀释液．在适宜条件下培养一段时间后，菌落周围灰绿色范围最大的，表示酒精量越高，即是高产菌株．     
（2）①在用发酵罐生产的过程中，一般采用抽样检测方法，通过出料口地方对发酵液进行定期观察计数，以了解发酵情形．
②果醋发酵需要利用醋酸菌，醋酸菌是嗜氧菌，也是嗜温菌，因此由果酒转变成制作果醋时，需要改变的环境条件是温度提高到30～35℃和通入无菌空气．
（3）评价生产的苹果酒、苹果醋优劣的最常用方法是嗅闻和品尝．
故答案为：
（1）①葡萄成熟落地流出的果汁   90   
②酸性  重络酸钾   10²、10³、10⁴       稀释涂布平板   灰绿色范围最大
（2）①抽样检测   出料口   ②菌种和发酵条件
（3）嗅闻和品尝

点评 本题考查果酒和果醋的制作以及微生物的分离与培养的有关知识，要求考生识记参与果酒、果醋制作的微生物，掌握相关技术的原理及条件，能结合所学的知识准确答题，属于考纲识记层次的考查．