33.(8分)利用纤维素解决能源问题的关键,是高性能纤维素酶的获取。请完善实验方案,并回答相关问题。
[实验目的]比较三种微生物所产生的纤维素酶的活性。
[实验原理]纤维素酶催化纤维素分解为葡萄糖,用葡萄糖的产生速率表示酶活性大小;用显色反应表示葡萄糖的生成量。
[实验材料]三种微生物(A-C)培养物的纤维素酶提取液,提取液中酶蛋白浓度相同。
[实验步骤]
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试管号 |
1 |
2 |
3 |
4 |
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蒸馏水 |
1.4 |
1.4 |
1.4 |
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pH7.5的缓冲液 |
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0.2 |
0.2 |
0.2 |
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纤维素悬浮液 |
0.3 |
0.3 |
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0.3 |
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微生物A提取液 |
0.1 |
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微生物B提取液 |
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微生物C提取液 |
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0.1 |
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总体积 |
2.0 |
2.0 |
2.0 |
2.0 |
(1)取四支试管,分别编号。
(2)在右表各列的一个适当位置,填写相应试剂的体积量,并按表内要求完成相关操作。
(3)将上述四支试管放入37℃的水浴,保温1小时。
(4)在上述四支试管中分别加入 试剂,
摇匀后,进行 处理。
(5)观察比较实验组的三支试管与对照组试管的颜色及其深浅。
[实验结果]
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微生物A提取物 |
微生物B提取物 |
微生物C提取物 |
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颜色深浅程度 |
+ |
+++ |
++ |
[分析讨论]
(1)该实验中的对照组是 号试管。
(2)实验组试管均呈现的颜色是 ,但深浅不同。
(3)上述结果表明:不同来源的纤维素酶,虽然酶蛋白浓度相同,但活性不同。若不考虑酶的最适pH和最适温度的差异,其可能原因是 。
(4)你认为上述三种微生物中,最具有应用开发价值的是 。
(5)从解决能源问题的角度,开发这种纤维素酶的意义在于
。
34A、(8分)下图为利用生物技术生产单克隆抗体和经体外受精培育优质奶牛的过程。请回答下列问题:
(1)细胞A的形成过程中常用的诱导因素有
(至少答两种)。
(2)在I图制备单克隆抗体的过程中,包括 和 两个过程。直接产生的A细胞可能有3种,经选择性培养的杂交瘤细胞,还需进行 ,经多次筛选就可获得足够数量的能分泌所需抗体的细胞,进行体内或体外培养。
(3)单克隆抗体与常规的血清抗体相比,其最大的优越性是 。
(4)Ⅱ过程优质奶牛的培育过程需要进行胚胎移植,移植后的胚胎能在受体子宫中存活,其生理基础是 。
(5)若要同时获得多头与此优质奶牛相同的小牛,可对Ⅱ中囊胚进行 ,操作过程需要特别注意的问题是: 。
34B.(8分)我国首例绿色荧光蛋白转基因克隆猪在东北农业大学的种猪场自然分娩产出,这标志着我国在转基因克隆猪技术领域已达到世界领先水平。下图为我国首例绿色荧光蛋白转基因克隆猪的培育过程示意图,请据图回答:
⑴过程①必需用到的酶是 。
⑵重组质粒除了带有绿色荧光蛋白基因以外,还必须含有启动子、终止子和
才能构成一个完整的基因表达载体。
⑶过程③将重组质粒导入猪胎儿成纤维细胞时,采用最多也最有效的方法是 。然后还要通过 技术来检测绿色荧光蛋白基因是否已重组到猪胎儿成纤维细胞的染色体DNA上。
⑷为了获得更多的猪卵母细胞,可通过对母猪注射促性腺激素的方法,做
处理,并将所采集到的卵母细胞在体外培养到 期即可通过显微操
作将其细胞核去除。
⑸早期胚胎的培养液成分较复杂,除一些无机盐和有机盐类外,还需添加维生素、激素、氨基酸、核苷酸等营养成分,以及 等物质。
⑹绿色荧光蛋白转基因克隆猪的培育过程属于 生殖。