3．PCR技术的操作步骤依次是　　　　　　　　　　　　　　　　　

A、高温变性、中温延伸、低温复性　　　 B、中温延伸、低温复性、高温变性

C、中温延伸、高温变性、低温复性　　　 D、高温变性、低温复性、中温延伸

2、镰刀型细胞贫血症的病因是血红蛋白基因的碱基序列发生了改变。检测这种碱基序列改变必须使用的酶是

A. 解旋酶　　　 B. 限制性内切酶　　　 C. DNA连接酶 　　　　　D、RNA聚合酶

1、切取牛的生长激素和人的生长激素基因，用显微注射技术将它们分别注入小鼠的受精卵中，从而获得了“超级鼠”，此项技术遵循的原理是

A．基因突变：DNA→RNA→蛋白质　 B．基因工程：DNA→RNA→蛋白质

C．细胞工程：DNA→RNA→蛋白质　 D．基因工程：RNA→RNA→蛋白质

34．(8分)上海某医院病理室为确诊一患者的肿瘤是良性还是恶性，切取了一小块肿瘤组织进行培养。请回答下列问题：

　(1)培养之前，肿瘤组织必须先用　　 　等处理成单个细胞。

　(2)若开始培养时取一滴培养液观察有100个肿瘤细胞，经24h培养后，取一滴稀释50倍后再取一滴(设三次的"一滴"等量)观察，发现有32个肿瘤细胞，此肿瘤的细胞周期约为　　h。

　(3)与正常细胞相比，在显微镜下可见明显增多的细胞器是(两项) 　　　　　　　　

(4)如果通过电子设备和其他生化手段已经初步判断是恶性的可能性很小，但在肿瘤组　 织进行培养了60代后，发现有恶性肿瘤细胞存在，那么你能否判断该肿瘤组织是恶性肿瘤？说明理由：　　　　　 。

(5)某科研单位研制出一种新型药物X，据说对此类肿瘤有较好的疗效，请你设计一个方案加以验证。简单写出你所设计的实验步骤：

　　 a．　　　　　　　　 　　　　　　　　　　；

　　 b．　　　　　　　　　　　　　　　　　　 ；

　　 c．　　　　　　　　　　　　　　　　　　 。

江苏省新海高级中学2009-2010学年度第二学期期中考试

33. (9分)将小鼠胚胎干细胞定向诱导分化成一种特定的细胞(命名为M细胞)，再将M细胞移植到糖尿病模型小鼠(胰岛细胞被特定药物破坏的小鼠)体内，然后测定小鼠的血糖浓度，结果如图所示(虚线表示正常小鼠的血糖浓度值)。请回答相关问题：

(1)实验用的胚胎干细胞取自小鼠的早期囊胚，取出胚胎后一般用特定酶将其分散成单个细胞再进行培养。根据实验结果可以判定M细胞已具有　　 　　细胞的功能。说明判定的理由　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　 　。

(2)用胰岛素基因片段做探针，对小鼠胚胎干细胞和M细胞进行检测。请在下表的空格中填上检测结果(用“+”表示能检测到，用“-”表示不能检测到)。

上述实验结果表明，胚胎干细胞通过　　　　　　　　 　　定向分化为M细胞。

(3)若将M细胞的细胞核移植到去核的卵细胞中，重组细胞能否分化为其他类型细胞？

　　，请说明理由：　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　 。

32．(8分)应用生物工程技术获得人们需要的生物新品种或新产品。请据图回答下列问题：

(1)在培育转入生长激素基因牛过程中，①过程需要的工具酶是___________，②过程常用的方法是_________。

(2)转入生长激素基因牛可通过分泌的乳汁来生产人生长激素，在基因表达载体中，人生长激素基因的首端必须含有_________________。③过程培养到桑椹胚或囊胚阶段，可以采用_____________技术，培育出多头相同的转基因犊牛。

(3)prG能激发细胞不断分裂，通过基因工程导入该调控基因来制备单克隆抗体，Ⅱ最可能是___________细胞，Ⅲ代表的细胞具有____________________的特点。

(4)在抗虫棉培育过程中，④过程中的受体细胞如果采用愈伤组织细胞，与采用叶肉细胞相比较，其优点是______________，⑤过程采用的技术是___________。

31．(8分)转基因产品的安全性目前已成为人们争论的焦点之一，但这并不能阻止转基因技术应用于生产实践的种种尝试，转基因小牛的诞生就是其中的一例。

人的血清白蛋白在临床上需求量很大，通常从人血中提取。由于艾滋病病毒(HIV)等人类感染性病原体造成的威胁与日俱增，使人们对血液制品顾虑重重。如果应用基因工程和克隆技术，将人的血清白蛋白基因转入奶牛细胞中，那么，利用牛的乳汁生产血清白蛋白就成为可能。大致过程如下：

a．将人体血清白蛋白基因导人雌性奶牛胚胎细胞，形成重组细胞①；

b．取出重组细胞①的细胞核，注入去核牛卵细胞中，形成重组细胞②；

c．电脉冲刺激重组细胞②促使其形成早期胚胎；

d，将胚胎移植到母牛的子宫内，最终发育成转基因小牛。

请回答下列问题：

(1)重组细胞①实现了　　　　　　　　　　　　　 的重组。

(2)重组细胞②实现了　　　　　　　　　　　　　 的重组。

(3)若将早期胚胎分离成若干个胚胎细胞，让其分别发育成一头小牛，这些小牛的基因型是否相同并说明理由　　　 　　　　　　　　　　　　。

(4)为什么实验过程中第一步要选择“雌性奶牛胚胎”？　　　　　　　　　　　　　 。

(5)上述(2)(3)分别利用的胚胎工程的技术是　　　　　 、　　　　　　 ，胚胎工程操作中的终端环节是　　　　　　　　　　　　　 。

29.(8分)2007年诺贝尔生理学或医学奖授予在“基因靶向”技术方面作出突出贡献的三位科学家。“基因靶向”技术，指的是应用DNA同源重组原理，通过一定的载体，用设计好的目的基因替代靶基因，从而达到使靶基因功能丧失的目的。借助这一技术，科学家可以用小鼠进行实验，使其体内的某项特定基因丧失功能，以帮助人们找到治疗疾病的有效方法。下面是该实验的基本过程，请回答有关问题。

(1)获得胚胎干细胞(ES细胞)。实验一般采用ES细胞作为目的基因的受体细胞，这是因为ES细胞具有发育的____________。举出一例获取ES细胞的常用方法：

________________________________________________________________________

(2)获取目的基因。目的基因是靶基因的同源片段。经过修饰使靶基因的功能改变或丧失，就可获得目的基因。如果要获得活性降低了的X酶蛋白的目的基因，可以采用蛋白质工程技术，请简述其过程：

预期X酶蛋白的功能→Ⅰ　　　　　　　　 → Ⅱ　　　　　　　　 →找到对应的脱氧核苷酸序列，并对X酶基因加以改造

(3)构建基因表达载体。质粒是具有自我复制能力的双链环状DNA，它所具有的一至多个______________位点，使目的基因插入其中成为可能，因此常被选作运载体。

(4)将基因表达载体导入ES细胞，从中筛选出成功发生了同源重组的ES细胞，然后培育出小鼠。

①由ES细胞培育出小鼠的过程中，需要采用　　　　　　　 和　　　　　　　 技术手段。　　　　　　

②通过检测目的基因是否表达出蛋白质产品，可以确定该小鼠体内是否成功发生了基因的同源重组。请简述这种检测方法。　　　　　　　　　　　　

　 30.(7分)下图为利用生物技术获得生物新品种的过程，据图回答：

(1)在基因工程中，A表示　　　　　 ，如果直接从苏云金杆菌中获得抗虫基因，①过

程使用的酶区别于其他酶的特点是　　　　　　　　　　　　 ，B表　　　　　　　 。

(2)B→C为转基因绵羊的培育过程中，其中④用到的生物技术主要有动物细胞培养和

　 　　　　　　　。在动物细胞培养过程中，需让培养液中含有一定量的CO₂，其主要作用是　　　　　　　 。

(3)B→D过程中，若使用的棉花受体细胞为体细胞，⑤表示的生物技术是　　　 。要确定目的的基因(抗虫基因)导入受体细胞后，是否能稳定遗传并表达，需进行检测和鉴定工作，请写出在个体水平上的鉴定过程：　　　　　　　　　　　　　 。

28. (7分)下面甲图为DNA决定某一多肽链中的酪氨酸和丙氨酸过程示意图，乙图示样品　 DNA经PCR技术(聚合酶链式反应)扩增，可以获取大量DNA克隆分子。请分析回答：

(1)甲图中含有 　　　种核苷酸；丙氨酸的遗传密码子是　 　　。该图表示了DNA中遗传信息的　　 　　　　　　　　　　过程。

(2) PCR(聚合酶链式反应)技术在生物工程中相当重要。请简述PER扩增目的基因的基本过程：　　　　　　 →　　　　　　　　　 →　　 　　　　　　→　　　　　　　　　

(3)乙图的“PCR”与人体内的DNA复制相比有何特殊之处?　　　　　　　　　 　。(至少答出2点)

(4)现在要通过“PCR”得到甲图中DNA片段的1024个克隆片段，则至少要向试管中加入

　 　　　　　　　　个腺嘌呤脱氧核苷酸。

27．(5分)镰刀形细胞贫血症是一种单基因遗传病，是由正常的血红蛋白基因(HbA)突变为镰刀形细胞贫血症基因(HbS)引起的如下图所示，该基因突变是由于___　　 __碱基对变成了__　　 __碱基对，这种变化会导致血红蛋白中____个氨基酸的变化。

HbA基因突变为HbS基因后，恰好丢失了一个MstⅡ限制酶切割位点。用MstⅡ限制酶切割胎儿DNA，然后用凝胶电泳分离酶切片段，片段越大，在凝胶上离加样孔越近。加热使酶切片段解旋后，用荧光标记的CTGACTCCT序列与其杂交，荧光出现的位置可能有下图所示A、B、C三种结果。若出现_　 _____结果，则说明胎儿患病；若出现__　　 ___结果，则说明胎儿是携带者。