32.(14分)现有甲、乙两种可能有一定毒性的化学物质，实验室研究人员计划通过动物细胞培养的方法来鉴定它们是否有毒性并比较二者毒性的强弱。请你以一个研究人员的身份参与此项研究，完成下列有关问题。

实验原理： 　　　　　　 　 　　　　。根据这种变异细胞占全部细胞的百分数(以下称Q值)，可判断该化学物质的毒性。

材料用具：活的小白鼠胚胎、胰蛋白酶液、动物细胞培养液、动物细胞固定液、适宜浓度的龙胆紫溶液、适宜浓度的化学物质甲溶液、适宜浓度的化学物质乙溶液、蒸馏水、滴管、显微镜、小白鼠正常有丝分裂各时期的高倍显微照片等。

实验步骤：

(1)制备细胞悬浮液。

把活的小白鼠胚胎放在培养液中剪碎，放入锥形瓶中，加入 　　　　　 处理，使胚胎组织离散成单个细胞，再加入动物细胞培养液，制成细胞悬浮液。

(2)进行细胞培养。

①取A、B、C3个洁净的培养瓶，分别放入　 　　　　　 ；

②向A、B两个培养瓶中分别放入　 　　　　　 ，C 中加入　 　 　 ，摇匀。

③把3个培养瓶放在适宜温度的恒温箱中培养。

(3)制作临时装片。

①当细胞增殖到大约8代左右时，同时从恒温箱中取出3个培养瓶，用 　 　　　　 处理，加入动物细胞固定液，迅速杀死细胞并固定细胞分裂相；

②静置一段时间后，分别从各培养瓶底部吸取适量的细胞悬浮液，滴在与培养瓶有相同编号的载玻片的中央，滴加1-2滴　 　 　　　 进行染色，3-5分钟后，盖上盖玻片。

(4)镜检和统计。

把临时装片放在显微镜下，先用　　 　　　　　 后用　 　　　　　 观察。为清晰观察染色体的形态，最好寻找处于　　 　　 　　　　　 期的细胞，并与小白鼠正常有丝分裂同时期的高倍显微照片进行对比，统计并计算Q值。

结果分析：经研究人员实验得知，A培养瓶Q值为1.3%,B培养瓶Q值为12.5%,C培养瓶Q值为0.1%.

结论：(1) 　　　　　　　 　　　 　　　　　。

(2)在实验中，C培养瓶起　　　　　 　 　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　 作用，C培养瓶的Q值说明　 　　 　 　　　 。

31．(8分)供体器官的短缺和排斥反应是制约器官移植的两个重要问题。而治疗性克隆能最终解决这些问题。下图是治疗性克隆的过程图解。

(1)正常情况下，去核的卵细胞取自于女性卵巢排卵后在输卵管中_________　　 期的卵母细胞。

(2)重组细胞发育的过程中，细胞开始分化发生在____________期。

　 　　　(3)治疗性克隆所用的技术名称是__________________，要想获得基因型完全相同的两个胚胎，可采用___________________技术。

　 　　　(4)干细胞是一类具有分裂能力的细胞，观察上图可知，血液组织干细胞经分裂、分化形成了不同功能的血细胞，细胞分化的机理是____________________　　　　　　　　　　　 。(2分)

(5)已知患者是红绿色盲的女性，图中提供卵细胞的为完全正常的年轻女性。移植器官后，该患者所生育子代红绿色盲的情况是________________________　　　　　　　　　　　 。(2分)

30．(14分)2007年11月20日，美、日两国在《科学》和《细胞》两份顶级学术期刊上发表研究成果：将人体皮肤细胞改造成可以分化为多种细胞的“万能细胞”。下图是“万能细胞”的诞生过程，图中OCT4、SOX2、NANOG和LIN28是在胚胎干细胞中能高度表达并决定其“全能性”的四个基因，将改造后的“万能细胞”植入小鼠身体上，植入的细胞长成了“肿瘤”，“肿瘤”中出现了神经、骨骼、肌肉等多种类型的细胞。请据图回答下列问题：

(1)胚胎干细胞又称ES细胞，是由___________________　　　　　 中分离出来的一类细胞，如果胚胎发育到了囊胚期，这时的__________________细胞就是ES细胞。

(2)胚胎干细胞在功能上具有发育的_______________。

(3)图中逆转录病毒的作用是________________________，过程③利用了逆转录病毒

_________________特性。

(4)万能干细胞经体外诱导分化，可以培育出人造组织器官，这样培育的特殊细胞或器官移回病人体内与异体器官移植相比，最大的优点是___________________________　　　　　　　 。

(5)请说出一种胚胎干细胞的应用____________________________________________　　　 。

29．(6分)胚胎移植的基本程序如下图(以胚胎移植为例)，请据图回答：

选择　　　　 供体母牛　　　　　　　　　　　　 受体母牛

　　┄┄┄┄┄┄┄┄　同期发情处理　┄┄┄┄┄┄┄┄┄　

　　　　↓

　　　　　　 超数排卵

　　　　↓

　供体公牛　 →配种

　　　　↓

　　　 　冲卵

　　　　　　　　 ↓

　　　　　　　 质量检查、培养　 →　　　　 胚胎移植

　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　 ↓

　　　　　　　 　　　　　　　　　　　　　　　妊娠检查

　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　 ↓

　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　 分娩(胚胎移植的犊牛)

(1)对供体母牛、供体公牛的要求是__________________________　　　　　　 ，对受体母牛的要求是______________________________　　　　　　　　　 。

(2)在胚胎移植操作中，为使胚胎在移植前后所处的生理环境保持一致，要对供、受体用激素进行___________________处理。

(3)一次给受体移入多个胚胎，产生的多个后代，其基因型都相同吗？_______________为什么？______________________________________________________________　　　　　 　。(2分)

28.(8分)番茄营养丰富，是人们喜爱的一类果蔬。但普通番茄细胞中含有多聚半乳糖醛酸酶基因，控制细胞产生多聚半乳糖醛酸酶，该酶能破坏细胞壁，使番茄软化，不耐贮藏。为满足人们的生产生活需要，科学家们通过基因工程技术，培育出了抗软化、保鲜时间长的番茄新品种。操作流程如图，请回答：

(1)过程①需要的工具酶有　　　　 　　　　　 。

(2)在构建基因表达载体时，重组DNA中除插入目的基因外，还需要有　 　　　　　 、终止子以及　 　　　　　 。

(3)在番茄新品种的培育过程中，将目的基因导入受体细胞的方法叫做　 　　　　　

(4)从图中可见，mRNA_l和mRNA₂的结合直接导致了　 　　　　　 无法合成，最终使番茄获得了抗软化的性状。多聚半乳糖醛酸酶基因与抗多聚半乳糖醛酸酶基因是否为等位基因？

　　 　　　　　 。

(5)普通番茄细胞导入目的基因后，经③过程形成　 　 ，然后诱导出试管苗，进一步培养成正常植株。

27．(7分)资料显示，近十年来，PCR技术(DNA聚合酶链式反应技术)成为分子生物实验的一种常规手段，其原理是利用DNA半保留复制的特性，在试管中进行DNA的人工复制(如下图)，在很短的时间内，将DNA扩增几百万倍甚至几十亿倍，使分子生物实验所需的遗传物质不再受限于活的生物体。请据图回答：

(1)加热至94℃的目的是使DNA样品的　　　 键断裂，这一过程在生物体细胞内是通过_______　　　　　 酶的作用来完成的。通过分析得出新合成的DNA分子中，A=T，C=G，这个事实说明DNA分子的合成遵循　　　　　　　　　　　　　　 。

(2)新合成的DNA分子与模板DNA分子完全相同的原因是:

　　　　　　　　　　　　　　　　 _　　 和　　　　　　　　　　　　　　　　　　 　　。

(3)通过PCR技术使DNA分子大量复制时，若将一个用¹⁵N标记的模板DNA分子(第一代)放入试管中，以¹⁴N标记的脱氧核苷酸为原料，连续复制到第五代时，含¹⁵N标记的DNA分子单链数占全部DNA总单链数的比例为　　　　　 　　　。

(4)PCR技术不仅为遗传病的诊断带来了便利，而且改进了检测细菌和病毒的方法。若要检测一个人是否感染了艾滋病病毒，你认为可以用PCR扩增血液中的(　 　　)

A．白细胞DNA　 　　　　　　 　B．病毒蛋白质 　　　

C．血浆抗体　 　　　　　　　 　D．病毒核酸

26．(8分)应用生物工程技术获得人们需要的生物新品种或新产品。请据图回答下列问题：

(1)在培育转人生长激素基因牛过程中，①过程需要的工具酶是____　　　 _______　　 　，②过程常用的方法是___　　　 ______。

(2)转人生长激素基因牛可通过分泌的乳汁来生产人生长激素，在基因表达载体中，人生长激素基因的首端必须含有_________________。③过程培养到桑椹胚或囊胚阶段，可以采用_____　　　 ________　　　　　　 技术，培育出多头相同的转基因犊牛。

(3)prG能激发细胞不断分裂，通过基因工程导入该调控基因来制备单克隆抗体，Ⅱ最可能是___________细胞，Ⅲ代表的细胞具有_________　　　 　　___________　　　　　　 的特点。

(4)在抗虫棉培育过程中，④过程中的受体细胞如果采用愈伤组织细胞，与采用叶肉细胞相比较，其优点是______________　　　　　　　　　 ，⑤过程采用的技术是______　　 _____　 。

25．下列属于转基因技术潜在的食物安全隐患的是 (　　 )

A. 转基因植物有可能合成出对人体有直接毒性或潜在毒性的物质

B．转基因植物合成的某些新的蛋白质有可能成为某些人的过敏源

C．某些转基因生物可能合成干扰素，进人人体增强相应细胞的免疫功能

D．某些基因可能使植物体内某些代谢途径发生变化，导致转基因农作物营养成分的改变

选择题答题表：　　　　　　　　　　　　　　　　　　　 　　　　得分： 　　　　　　　　　

第Ⅱ卷(非选择题　 共65分)

24．表现型不同的母牛生育出基因型完全相同的小牛，这需要的技术是(　　 )

　 　A．受精卵移植　 　　　B．胚胎分割　 　　　C．胚胎移植　 　　　D．克隆

23．关于受精过程的叙述正确的是　 (　　 )

　 A．获能后的精子与卵子相遇后，释放顶体酶穿过透明带进入放射冠

　 B．透明带反应是防止多精入卵的第一道屏障

C．精子与卵黄膜相互融合，精子入卵

D．雄原核形成的同时，卵子完成减数第二次分裂