摘要:其次还要检测目的基因是否转录出了mRNA.方法是采用用标记的目的基因作探针与mRNA杂交.

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在药品生产中,人们逐步利用基因工程技术生产出如干扰素,白细胞介素,凝血因子等各种高质量低成本的药品,请分析回答:

(1)在用目的基因与质粒形成重组DNA过程中,一般要用到的工具酶是限制酶和____________,其中限制酶切割的是_________键

(2)将含有“某激素基因”的质粒导入细菌细胞后,能在细菌细胞内直接合成“某激素”,则该激素在细菌体内的合成包括_________和_________两个阶段。

(3)基因工程形成工程菌的遗传学原理是_____________。

(4)基因工程操作的第四步是目的基因的检测与鉴定,其中分子水平的检测又分三步:首先要检测转基因生物的DNA是否插入了目的基因,采用技术是            ;其次还要检测目的基因是否转录出了mRNA,方法是            ;最后检测目的基因是否翻译成蛋白质,方法是              。

(5)为了解基因结构,通常选取一特定长度的线性DNA分子,先用一种限制酶切割,通过电泳技术将单酶水解片段分离,计算相对大小;然后再用另一种酶对单酶水解片段进行降解,分析片断大小。下表是某小组进行的相关实验。

已知一线性DNA序列共有5000bp(bp为碱基对)

第一步水解

产物

(单位bp)

第二步水解

产物

(单位bp)

A酶切割

1900

将第一步水解产物分离后,分别用B酶切割

1700  200

1500

800  700

1600

   1100 500

由实验可知,在这段已知序列上,A酶与B酶的识别序列分别为______个和_____个。

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 请回答下列有关基因工程的问题:

(1)如果用某种生物发育的某个时期的mRNA反转录产生的          片段,与载体连接后储存在一个受体菌群中,这个受体菌群体就叫做这种生物的           。

(2)目的基因进入受体细胞内,并且在受体细胞内维持稳定和表达的过程,称为        。将目的基因导入植物细胞采用最多的方法是         法。转基因动物中采用最多,也是最为有效的一种将目的基因导入动物细胞的方法是        。大肠杆菌最常用的转化方法是:首先用Ca2+处理细胞,使细胞处于一种              的生理状态,这种状态的细胞被称作感受态细胞。然后将重组表达载体DNA溶于缓冲液中与感受态细胞混合,在一定的温度条件下促进                       ,完成转化过程。

(3)目的基因导入受体细胞后,是否可以稳定维持和表达其遗传特性,只有通过检测与鉴定才能知道。首先,要检测转基因生物        上是否插入了目的基因。其次,还需要检测目的基因是否          。最后检测目的基因是否           。

(4)利用PCR技术扩增目的基因,其原理与细胞内DNA复制类似。PCR反应体系中含有热稳定DNA聚合酶,下面的表达式不能正确反映DNA聚合酶的功能,这是因为        

                                                                             。

(5)用限制酶EcoRV、Mbol单独或联合切割同一种质粒,得到的DNA片段长度如下图(1 kb

  即1000个碱基对),请在下图质粒上画出EcoRV、Mbol的切割位点。

(6)基因工程中使用的限制酶,其特点是                                          。

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(16分)Ⅰ、马铃薯是种植广泛的农作物,病毒侵染后导致产量大幅下降,培育脱毒和抗毒的马铃薯品种是提高产量的有效方法。请分析并回答。

(1)马铃薯茎尖病毒极少甚至无病毒,因此可将马铃薯茎尖接种在培养基中,培养基中添加生长素和细胞分裂素,诱导离体细胞经过_______________和_____________完成组织培养过程,从而形成脱毒苗。此过程说明植物细胞具有________________。

(2)为获得抗病毒的马铃薯植株,往往采用转基因技术,将病毒复制酶基因转移到马铃薯体内。其过程大致如下图所示。

①上述过程中,将目的基因导入马铃薯细胞使用了______________法。导入农杆菌时,首先要构建基因表达载体,这里需要的工具酶有_______________和_____________,还要用________处理土壤农杆菌,使之转变为感受态,然后将它们在缓冲液中混合培养以完成转化过程。目的基因导入马铃薯细胞后,是否可以稳定维持和表达,要通过检测与鉴定,马铃薯的DNA上是否插入了目的基因的检测方法是_______________________________,目的基因是否转录出了mRNA的检测方法是_______________________,目的基因是否翻译成蛋白质的检测方法是__________________________;通过做抗病毒接种实验,可以检测马铃薯是否具有抗病毒的特性,属于________水平的检测。

②该转基因马铃薯产生的配子中____________(填“一定”或“不一定”)含有目的基因。

Ⅱ、1975年科学家首次利用B淋巴细胞杂交瘤技术制备出单克隆抗体。请根据图回答问题:

(1)病原体注入小鼠体内后,要经过__________细胞处理后形成抗原—MHG复合体,才能被免疫细胞识别。

(2)制备单克隆抗体所用的B淋巴细胞一般从脾中采集,然后以__________________作诱导剂,使B淋巴细胞和骨髓瘤细胞融合。通过筛选和克隆培养,获得的杂交瘤细胞具有的特点是:

___________________________________________________________。

(3)单克隆抗体的特点是_____________________________________________________。

 

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