题目内容

 请回答下列有关基因工程的问题:

(1)如果用某种生物发育的某个时期的mRNA反转录产生的          片段,与载体连接后储存在一个受体菌群中,这个受体菌群体就叫做这种生物的           。

(2)目的基因进入受体细胞内,并且在受体细胞内维持稳定和表达的过程,称为        。将目的基因导入植物细胞采用最多的方法是         法。转基因动物中采用最多,也是最为有效的一种将目的基因导入动物细胞的方法是        。大肠杆菌最常用的转化方法是:首先用Ca2+处理细胞,使细胞处于一种              的生理状态,这种状态的细胞被称作感受态细胞。然后将重组表达载体DNA溶于缓冲液中与感受态细胞混合,在一定的温度条件下促进                       ,完成转化过程。

(3)目的基因导入受体细胞后,是否可以稳定维持和表达其遗传特性,只有通过检测与鉴定才能知道。首先,要检测转基因生物        上是否插入了目的基因。其次,还需要检测目的基因是否          。最后检测目的基因是否           。

(4)利用PCR技术扩增目的基因,其原理与细胞内DNA复制类似。PCR反应体系中含有热稳定DNA聚合酶,下面的表达式不能正确反映DNA聚合酶的功能,这是因为        

                                                                             。

(5)用限制酶EcoRV、Mbol单独或联合切割同一种质粒,得到的DNA片段长度如下图(1 kb

  即1000个碱基对),请在下图质粒上画出EcoRV、Mbol的切割位点。

(6)基因工程中使用的限制酶,其特点是                                          。

(1)多种互补DNA     cDNA(部分基因)文库

(2)转化     农杆菌转化    显微注射技术

     能吸收环境中DNA   感受态细胞吸收DNA

(3)染色体的DNA   转录出了mRNA   翻译成蛋白质

(4) DNA聚合酶只能将单个脱氧核苷酸连  续结合到双链DNA片段的引物链上

(5)见右图

(6)特异性地识别和切割DNA

练习册系列答案
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回答下列关于基因工程的相关问题。

质粒是基因工程中的一种常用的工具之一,经修饰改造后的质粒如下图七一1所示。PUC118上的Lacz基因编码β半乳糖苷酶的一条多肽链,其表达产物与菌落颜色有关;经“修饰”后的“多克隆位点”位于LacZ基因之中。AmpR是抗氮卞青霉素基因。

1.PUC118上的基因AmpR作用的是:________“多克隆位点”中含有多种限制酶的识别序列,如HindⅢ,其切割后产生的DNA片断中含有的部分序列是,则限制酶HindⅢ的识别序列是________。

2.图2示意将目的基因导入大肠杆菌的操作步骤。其中,I~V表示操作过程;A-F表示使用的相关工其,其中的E1和E2表示有关的酶。试问:E2应是________(酶);经过E2的切割,供体染色体中的DNA片段中游离的磷酸基团总数的变化是:________。

在策略上,图1中的“多克隆位点”包含了多种、多个识别序列,请说出设计这种“多克隆位点”的目的:________。

3.LacZ基因可以使细菌在含有X-gttl(5-溴-4-氯-3-吲哚-B-D-半乳糖)底物和IPTG(一种乳糖类似物)的培养基上形成蓝色的菌落,即X-gal被lacZ基因编码产生的鼻半乳糖昔酶水解成蓝色;若要形成重组质粒,则在含X-gal的培养基上将形成白色菌落(而不是蓝色的)。

请据图2分析下列问题:

①用本无PUC118的大肠杆菌作为受体细胞,将培养瓶C中被连接处理后的DNA混合物倾入含X-gal、IPTG和________的D培养基平板上,其目的是________。

菌落生长结果图2中所示。

②过程V进行转移培养,则该应该挑选X、Y、Z中的________菌落进行液体培养。形成该颜色的生理原因是________。如此目的基因便被克隆了!

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