摘要:(三)实验操作: ①将pH分别为5.7.9的过氧化氢溶液30ml分别倒入甲.乙.丙三只烧杯内, ②同时放入三张滤纸片.记录每张滤纸片上浮所用时间, ③将实验过程数据统计填表. 请设计实验记录表格:

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利用纤维素解决能源问题的关键,是高性能纤维素酶的获取。请完善实验方案,并回答相关问题。

[实验目的]比较三种微生物所产生的纤维素酶的活性。

[实验原理]纤维素酶催化纤维素分解为葡萄糖,用葡萄糖的产生速率表示酶活性大小;用呈色反应表示葡萄糖的生成量。

[实验材料]三种微生物(A~C)培养物的纤维素酶提取液,提取液中酶蛋白浓度相同。

[实验步骤](1)取四支试管,分别编号。

(2)在下表4列中每列的一个适当位置,填写相应试剂的体积量,并按表内要求完成相关操作。

(3)将上述四支试管放入37℃的水浴,保温1小时。

(4)在上述四支试管中分别加入等量_________试剂,摇匀后,进行_________处理。

(5)观察比较实验组的三支试管与对照组试管的颜色深浅。

[实验结果]

[分析讨论]

(6)该实验中的对照组是_________号试管。

(7)实验组试管均呈现的颜色是_________,但深浅不同。

(8)上述结果表明:不同来源的纤维素酶,虽然酶蛋白浓度相同,但活性不同。若不考虑酶的最适pH和最适温度的差异,从氨基酸层次上分析其可能原因是不同酶本身的_________。

(9)你认为上述三种微生物中,最具有应用开发价值的是微生物_________。某科研小组从该微生物中得到高性能纤维素酶后,在最适温度、最适pH值的条件下,对该酶的催化反应过程进行研究,得到产物浓度随时间的变化曲线图。

请根据以上实验结果,回答下列问题:

①当一开始时,将混合物中纤维素酶的浓度增加50%,在上图画出反应过程中产物浓度随时间变化的曲线(请用“1”标注)。

②当一开始时,将混合物中纤维素酶的反应温度降低10℃,请在上图中画出理想条件下产物浓度随时间变化的曲线(用“2”标注温度降低后的变化曲线)。

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(1)PCR(聚合酶链式反应)技术在生物工程中相当重要。请简述.PCR扩增目的基因的基本过程。

(2)制备培养基方法:将蛋白胨、NaCl和牛肉膏放入烧杯内,加200mL蒸馏水,用玻璃棒搅匀后,在酒精灯上加热。当蛋白胨、牛肉膏融化后,加入琼脂,用微火继续加热至琼脂溶化,补充水至200Ml。用0.1mol/L。的NaOH或0.1mol/L的HCl将pH调至7.0--7.2,分别对培养基和培养皿进行高压蒸汽灭菌。当培养基的温度下降到50℃时,将其分装在5套培养皿中,在酒精灯附近倒平板,当培养基冷却至室温,按下表分别进行处理。将处理完毕的培养基置于35℃的温度下培养2~3天,观察每个培养基中的细菌生长情况。请回答下列问题:

  第1套

开盖,在空气中暴露10s

  第2套

用手指接触培养基约10s

  第3套

用硬币接触培养基约10s

  第4套

用滤纸擦一下课桌,再接触培养基约10s

  第5套

(不打开盖)

①上述实验中有哪些是无菌操作               。

②第5套培养皿的作用是               。如果其培养基表面有菌落生长,说明了                                                      。

③在1到4套的培养基中都出现了不同形态的菌落,原因是              。

能否说菌落的形态越多,用来接触的物体吸附的细菌数目就越多,为什么?

                                                                        

④实验中,有三处特别强调温度控制,请简要说明其控制温度的科学道理。

“高压蒸汽灭菌后培养基的温度下降到50~C'’才倒平板:                         。

“当培养基冷却至室温,按下表分别进行处理”:                               。

 “将处理完毕的培养基置于35%的温度下培养”:                                。

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(1)PCR(聚合酶链式反应)技术在生物工程中相当重要。请简述PCR扩增目的基因的基本过程。______________________________。

(2)制备培养基方法:将蛋白胨、NaCl和牛肉膏放入烧杯内,加200 mL蒸馏水,用玻璃棒搅匀后,在酒精灯上加热。当蛋白胨、牛肉膏溶化后,加入琼脂,用微火继续加热至琼脂熔化,补充水至200 mL。用0.1 mol/L的NaOH或0.1 mol/L的HCl将pH调至7.0~7.2,分别对培养基和培养皿进行高压蒸汽灭菌。当培养基的温度下降到50 ℃时,将其分装在5套培养皿中,在酒精灯火焰附近倒平板,当培养基冷却至室温,按下表分别进行处理。将处理完毕的培养基置于35 ℃的温度下培养2~3天,观察每个培养基中的细菌生长情况。请回答下列问题:

第1套

开盖,在空气中暴露10 s

第2套

用手指接触培养基约10 s

第3套

用硬币接触培养基约10 s

第4套

用滤纸擦一下课桌,再接触培养基约10 s

第5套

(不打开盖)

①上述实验中有哪些是无菌操作______________。

②第5套培养皿的作用是________。如果其培养基表面有菌落生长,说明___________________。

③在1到4套的培养基中都出现了不同形态的菌落,原因是____________。

能否说菌落的形态越多,用来接触的物体吸附的细菌数目就越多,为什么?

________________。

④实验中,有三处特别强调温度控制,请简要说明其控制温度的科学道理。

高压蒸汽灭菌后“培养基的温度下降到50 ℃时”才倒平板: ___________。

“当培养基冷却至室温,按下表分别进行处理”:____________________。

“将处理完毕的培养基置于35 ℃的温度下培养”:_____________________________。

 

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(09汉沽一中第六次月考)(生物技术实践,15分)

(1)PCR(聚合酶链式反应)技术在生物工程中相当重要。请简述.PCR扩增目的基因的基本过程。

(2)制备培养基方法:将蛋白胨、NaCl和牛肉膏放人烧杯内,加200mL蒸馏水,用玻璃棒搅匀后,在酒精灯上加热。当蛋白胨、牛肉膏融化后,加入琼脂,用微火继续加热至琼脂溶化,补充水至200Ml。用0.1mol/L。的NaOH或0.1mol/L的HCl将pH调至7.0--7.2,分别对培养基和培养皿进行高压蒸汽灭菌。当培养基的温度下降到50℃时,将其分装在5套培养皿中,在酒精灯附近倒平板,当培养基冷却至室温,按下表分别进行处理。将处理完毕的培养基置于35℃的温度下培养2~3天,观察每个培养基中的细菌生长情况。请回答下列问题:

  第1套

开盖,在空气中暴露10s

  第2套

用手指接触培养基约10s

  第3套

用硬币接触培养基约10s

  第4套

用滤纸擦一下课桌,再接触培养基约10s

  第5套

(不打开盖)

①上述实验中有哪些是无菌操作               。

②第5套培养皿的作用是               。如果其培养基表面有菌落生长,说明了                         。

③在1到4套的培养基中都出现了不同形态的菌落,原因是              。能否说菌落的形态越多,用来接触的物体吸附的细菌数目就越多,为什么?

④实验中,有三处特别强调温度控制,请简要说明其控制温度的科学道理。

“高压蒸汽灭菌后培养基的温度下降到50℃”才倒平板:                        。

“当培养基冷却至室温,按下表分别进行处理”:                               。

“将处理完毕的培养基置于35%的温度下培养”:                              。

 

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萌发的禾谷类种子中淀粉酶活性较强,主要有α-淀粉酶和β-淀粉酶。α-淀粉酶不耐酸、较耐热,在pH为3.6以下迅速失活,而β-淀粉酶不耐热,在70℃ 15min后失活。根据它们的这种特性,可分别测定一种酶的催化效率。请协助完成“测定小麦种子中α-淀粉酶催化效率”的实验。

实验材料:萌发3天的小麦种子(芽长约1cm)。

主要试剂及仪器:1mg/mL的标准麦芽糖溶液、5%淀粉溶液、斐林试剂、蒸馏水、石英砂恒温水浴锅等。

实验步骤:

步骤一:制作麦芽糖标准。取 7 支干净的具塞刻度试管,编号,按表加入试剂,再将试管置于60℃水浴中加热 2min,取出后按试管号顺序排列。

试剂

试管号

1

2

3

4

5

6

7

麦芽糖标准液(mL)

0

0.2

0.6

1.0

1.4

1.6

2.0

蒸馏水(mL)

2.0

 

 

 

 

 

 

麦芽糖含量(mg)

0

0.2

0.6

1.0

1.4

1.6

2.0

斐林试剂(mL)

2.0

2.0

2.0

2.0

2.0

2.0

2.0

步骤二:制备酶液。

步骤三:______________________。

步骤四:另取四支试管,编号A、B、C、D,向A、B试管中各加5mL 5%淀粉溶液,向C、D试管中分别加入2mL已经处理的酶溶液(忽略少量的麦芽糖)和蒸馏水,将四支试管置于40℃恒温水浴中保温10min ,然后将C、D试管中的溶液分别加入到A、B试管中,摇匀后继续在40℃恒温水浴中保温10min。

步骤五:_________________。

结果分析:将A试管中颜色与第①步中获得的麦芽糖标准进行比较,获得该试管中麦芽糖浓度,并计算出α—淀粉酶催化效率。

结果分析:(略)

分析上述步骤回答:

(1)步骤一的2~7试管中加入蒸馏水的量分别是__________(单位mL)。

(2)步骤三的实验操作是__________________。

(3)步骤五的实验操作是__________________。

(4)实验中B试管所起的具体作用是________________。

 

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