59．若将上图所示X－1、X－2、X－3、X－4四种质粒导入大肠杆菌，然后分别涂布在含有青霉素或四环素的两种培养基上。在这两种培养上均不能生长的大肠杆菌细胞类型有＿＿＿＿、＿＿＿。

答案: 无质粒细胞　 含X-3的细胞

58．将两端用E1切开的Tc^r基因与用E1切开的质粒X－1混合连接，连接后获得的质粒类型有＿＿＿。(可多选)

A．X－1　　　 　B．X－2　　 　 C．X－3　　 　 D．X－4

答案: ABC

57．基因工程中使用的限制酶，其特点是＿＿。

答案: 特异性识别和切割DNA

下图四种质粒含有E1和E2两种限制酶的识别，Ap^r表示抗青霉素的抗性基因，Tc^r表示抗四环素的抗性基因。

4、(11年上海卷)回答下列有关基因工程的问题。

3、(2011年安徽卷)家蚕细胞具有高效表达外源基因能力。将人干扰素基因导入家蚕细胞并大规模培养，可以提取干扰素用于制药。

(1)进行转基因操作前，需用___________酶短时处理幼蚕组织，以便获得单个细胞。

(2)为使干扰素基因在家蚕细胞中高效表达，需要把来自cDNA文库的干扰素基因片段正确插入表达载体的_________和___________之间。

(3)采用PCR技术可验证干扰素基因是否已经导入家蚕细胞。改PCR反应体系的主要成分应该包含：扩增缓冲液(含Mg²⁺)、水，4种脱氧核糖苷酸、模板DNA、_____________和_________________。

(4)利用生物反应器培养家蚕细胞时，的细胞会产生接触抑制。通常将多孔的中空薄壁小玻璃珠放入反应器中，这样可以_________________增加培养的细胞数量，也有利于空气交换。

答案：(1)胰蛋白酶(或胶原蛋白酶) (2)启动子 终止子 (3)TaqDNA聚合酶　 对干扰素基因特异性的DNA引物对　 (4)增大细胞贴壁生长的附着面积

2、(11年北京卷)

T-DNA可能随机插入植物基因组内，导致被插入基因发生突变。用此方法诱导拟南芥产生突变体的过程如下：种植野生型拟南芥，待植物形成花蕾时，将地上部分浸入农杆菌(其中的T-DNA上带有抗除草剂基因)悬浮液中以实现转化。在适宜条件下培养，收获种子(称为T1代)。

(1)为促进植株侧枝发育以形成更多的花蕾，需要去除　　　 ，因为后者产生的

　 　　　会抑制侧芽的生长。

(2) 为筛选出已转化的个体，需将T代播种在含　　　　 的培养基上生长，成熟后自交，收获种子(称为T代)。

(3) 为筛选出具有抗盐性状的突变体，需将T代播种在含　　　　 的培养基上，获得所需个体。

(4)经过多代种植获得能稳定遗传的抗盐突变体。为确定抗盐性状是否由单基因突变引起，需将该突变体与　　　 植株进行杂交，再自交　　　 代后统计性状分离比。

(5)若上述T-DNA的插入造成了基因功能丧失，

从该突变体的表现型可以推测野生型基因的存在导致植物的抗盐性　　　 。

(6)根据T-DNA的已知序列，利用PCR技术可以扩增出被插入的基因片段。

其过程是：提取　　　 植株的DNA，用限制酶处理后，再用　　　 将获得

的DNA片段连接成环(如右图)以此为模板，从图中A、B、C、D四种单链

DNA片断中选取　　 作为引物进行扩增，得到的片断将用于获取该基因的全序列信息。

答案：

(1)顶芽　 生长素

(2)(一定浓度的)除草剂

(3)(一定浓度的)盐

(4)野生型　　 1

(降低

(6)突变体　　 DNA连接酶　　 B、C

1、(2011年江苏卷)请回答基因工程方面的有关问题：

(1)利用PCR技术扩增目的基因，其原理与细胞内DNA复制类似(如下图所示)。　 图中引物为单链DNA片段，它是子链合成延伸的基础。

①从理论上推测，第四轮循环产物中含有引物A的DNA片段所占的比例为　 ▲ 。

②在第　 ▲　 轮循环产物中开始出现两条脱氧核苷酸链等长的DNA片段。

(2)设计引物是PCR技术关键步骤之一。某同学设计的两组引物(只标注了部分碱基序列)都不合理(如下图)，请分别说明理由。

　①第1组：　 ▲　 ；　 ②第2组：　 ▲　 。

(3) PCR反应体系中含有热稳定DNA聚合酶，下面的表达式不能正确反映DNA聚合酶的　 功能，这是因为　 ▲ 。

(4)用限制酶EcoRV、Mbol单独或联合切割同一种质粒，得到的DNA片段长度如下图(1 kb

　 即1000个碱基对)，请在答题卡的指定位置画出质粒上EcoRV、Mbol的切割位点。

　答案：

　 (1)①15/16　　 ②三

　 (2)①引物I和引物Ⅱ局部发生碱基互补配对而失效

　　 ②引物I’自身折叠后会出现局部碱基互补配对而失效

(3) DNA聚合酶只能将单个脱氧核苷酸连续结

　 合到双链DNA片段的引物链上

(4)见右图

3．(11年上海卷)右图表示雄果蝇进行某种细胞分裂时，处于四个不同阶段　 的细胞(Ⅰ－Ⅳ)中遗传物质或其载体(①－③)的数量。下列表述与图中信息相符的是

　　 A．Ⅱ所处阶段发生基因自由组合　　　　　　　

B．Ⅲ代表初级精母细胞

C．②代表染色体　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　

D．Ⅰ－Ⅳ中的数量比是2：4：4：1

答案：A

2、(2011年江苏卷)右图为基因型AABb的某动物进行细胞分裂的示意图。相关判断错误的是　

　 A．此细胞为次级精母细胞或次级卵母细胞

　 B．此细胞中基因a是由基因A经突变产生

　 C．此细胞可能形成两种精子或一种卵细胞

D．此动物体细胞内最多含有四个染色体组

答案： A

1、(11年山东卷)基因型为小鼠仅因为减数分裂过程中染色体未正常分离，而产生一个不含性染色体的AA型配子。等位基因A、a位于2号染色体。下列关于染色体未分离时期的分析，正确的是

①2号染色体一定在减数第二次分裂时末分离

②2号染色体可能在减数第一次分裂时末分离

③性染色体可能在减数第二次分裂时末分离

④性染色体一定在减数第一次分裂时末分离

A.①③　　　　　　 B. ①④　　　　　 C. ②③　 　　　D.②④

答案：A