31.(11年重庆卷) (16分)拟南芥是遗传学研究的模式植物,某突变体可用于验证相关的基因的功能。野生型拟南芥的种皮为深褐色(TT),某突变体的种皮为黄色(tt),下图是利用该突变体验证油菜种皮颜色基因(Tn)功能的流程示意图。

(1)与拟南芥t基因的mRNA相比,若油菜Tn基因的mRNA中UGA变为AGA,其末端序列成为“-AGCGCGACCAGAACUCUAA”,则Tn比t多编码   个氨基酸(起始密码子位置相同,UGA、UAA为终止密码子)。

(2)图中①应为   。若②不能在含抗生素Kan的培养基上生长,则原因是      .若③的种皮颜色为     ,则说明油菜基因与拟南芥T基因的功能相同。

(3)假设该油菜基因连接到拟南芥染色体并替换其中一个t基因,则③中进行减数分裂的细胞在联会时的基因为    ;同时,③的叶片卷曲(叶片正常对叶片卷曲为显性,且与种皮性状独立遗传),用它与种皮深褐色、叶片正常的双杂合体拟南芥杂交,其后代中所占比列最小的个体表现为    ;取③的茎尖培养成16颗植珠,其性状通常        (填 不变或改变)。

(4)所得的转基因拟南芥与野生型拟南芥     (填是或者不是)同一个物种。

答案:31.(16分)

(1)2

(2)重组质粒(重组DNA分子)   重组质粒未导入   深褐色

(3)TnTntt;  黄色正常、黄色卷曲;  不变

(4)是

解析:

通过对基因工程和遗传知识相结合来考查学生对该部分知识的掌握,属中档题,较难。

油菜Tn基因的mRNA中UGA变为AGA,而末端序列为“--AGCGCGACCAGACUCUAA--”,在拟南芥中的UGA本是终止密码子不编码氨基酸,而在油菜中变为AGA可编码一个氨基酸,而CUC还可编码一个氨基酸,直到UAA终止密码子不编码氨基酸。

假设油菜Tn基因连接到拟南芥染色体并替换其是一个t基因,注意拟南芥是指实验有的突变体tt,所以③转基因拟南芥基因型为Tnt,减数分裂联会时形成四分体是由于染色体进行了复制,基因也进行了复制,因而基因型为TnTnt t。

设③转基因拟南芥的叶片卷曲与正常叶是由B、b基因控制,正常叶为显性,而该对性状与种皮性状为独立遗传,则这两对性状遵循基因的分离与自由组合定律。则:

③转基因拟南芥  ╳  双杂合拟南芥

Tntbb        TtBb

进行逐对分析:Tnt╳Tt     1/4TnT 、 1/4Tnt、1/4 Tt  、1/4tt

由于Tn和T的功能相同,所以表示为3/4T--(深褐色)、1/4tt(黄色)

bb╳Bb     1/2 Bb(正常叶)、1/2 bb(卷曲叶)

所以后代中有四种表现型;

3/8种皮深褐色正常叶;3/8种皮深褐色卷曲叶

1/8种皮黄色正常叶;1/8种皮黄色卷曲叶

取③转基因拟南芥的茎尖培养为植物组织培养为无性生殖,所以后代性一般不变。(排除基因突变)

由上可知所得③转基因拟南芥Tnt和野生型拟南芥TT两个品种相当于发生基因突变,没有隔离,能杂交产生可育后代,因此是同一个种。

此套题难度不大,考查识记的偏多,理解推理分析较少,而填空题中类似判断题型的填空又多,降低了难度,而不能很好考查学生能力,区分度不明显。

31.(2011年安徽卷)(21分)Ⅱ.(9分)家蚕细胞具有高效表达外源基因能力。将人干扰素基因导入家蚕细胞并大规模培养,可以提取干扰素用于制药。

(1)进行转基因操作前,需用___________酶短时处理幼蚕组织,以便获得单个细胞。

(2)为使干扰素基因在家蚕细胞中高效表达,需要把来自cDNA文库的干扰素基因片段正确插入表达载体的_________和___________之间。

(3)采用PCR技术可验证干扰素基因是否已经导入家蚕细胞。改PCR反应体系的主要成分应该包含:扩增缓冲液(含Mg2+)、水,4种脱氧核糖苷酸、模板DNA、_____________和_________________。

(4)利用生物反应器培养家蚕细胞时,的细胞会产生接触抑制。通常将多孔的中空薄壁小玻璃珠放入反应器中,这样可以_________________增加培养的细胞数量,也有利于空气交换。

答案:(1)胰蛋白酶(或胶原蛋白酶) (2)启动子 终止子 (3)TaqDNA聚合酶  对干扰素基因特异性的DNA引物对  (4)增大细胞贴壁生长的附着面积

解析:考查的知识点为动物细胞培养和基因工程.

(1)为了使组织分散开为单个细胞通常用胰蛋白酶或胶原蛋白酶。

(2)启动子位于目的基因的首端,终止子位于目的基因的尾端。

(3)PCR反应体系的主要成分应扩增缓冲液(含Mg2+)、水,4种脱氧核糖苷酸、模板DNA 、TaqDNA聚合酶、两种引物。

(4)细胞离体培养时通常表现出:贴壁生长和接触抑制,多孔的中空薄壁小玻璃珠能增大贴壁生长的附着面积,增加培养的细胞数量.

31.(11年北京卷)(16分)

T-DNA可能随机插入植物基因组内,导致被插入基因发生突变。用此方法诱导拟南芥产生突变体的过程如下:种植野生型拟南芥,待植物形成花蕾时,将地上部分浸入农杆菌(其中的T-DNA上带有抗除草剂基因)悬浮液中以实现转化。在适宜条件下培养,收获种子(称为T1代)。

(1)为促进植株侧枝发育以形成更多的花蕾,需要去除    ,因为后者产生的

     会抑制侧芽的生长。

(2) 为筛选出已转化的个体,需将T代播种在含     的培养基上生长,成熟后自交,收获种子(称为T代)。

(3) 为筛选出具有抗盐性状的突变体,需将T代播种在含     的培养基上,获得所需个体。

(4)经过多代种植获得能稳定遗传的抗盐突变体。为确定抗盐性状是否由单基因突变引起,需将该突变体与    植株进行杂交,再自交    代后统计性状分离比。

(5)若上述T-DNA的插入造成了基因功能丧失,

从该突变体的表现型可以推测野生型基因的存在导致植物的抗盐性    。

(6)根据T-DNA的已知序列,利用PCR技术可以扩增出被插入的基因片段。

其过程是:提取    植株的DNA,用限制酶处理后,再用    将获得

的DNA片段连接成环(如右图)以此为模板,从图中A、B、C、D四种单链

DNA片断中选取   作为引物进行扩增,得到的片断将用于获取该基因的全序列信息。

答案:31(16分)

(1)顶芽  生长素

(2)(一定浓度的)除草剂

(3)(一定浓度的)盐

(4)野生型   1

(降低

(6)突变体   DNA连接酶   B、C

 0  213201  213209  213215  213219  213225  213227  213231  213237  213239  213245  213251  213255  213257  213261  213267  213269  213275  213279  213281  213285  213287  213291  213293  213295  213296  213297  213299  213300  213301  213303  213305  213309  213311  213315  213317  213321  213327  213329  213335  213339  213341  213345  213351  213357  213359  213365  213369  213371  213377  213381  213387  213395  447348 

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