30.
(22分)回答下列Ⅰ、Ⅱ小题:
Ⅰ.转基因抗病香蕉的培育过程如图所示。质粒上有PstⅠ、SmaⅠ、EcoRⅠ、ApaⅠ等四种限制酶切割位点。请回答:
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(1)构建含抗病基因的表达载体A时,应选用限制酶
,对
进行切割。
(2)培养基中的卡那霉素会抑制香蕉愈伤组织细胞的生长,欲利用该培养基筛选已导入抗病基因的香蕉细胞,应使基因表达载体A中含有
,作为标记基因。
(3)香蕉组织细胞具有
,因此,可以利用组织培养技术将导入抗病基因的香蕉组织细胞培育成植株。图中①、②依次表示组织培养过程中香蕉组织细胞的
。
Ⅱ.原生质体是去掉细胞壁的由质膜包裹具有生活力的裸露细胞。酶解法制备原生质体的原理是利用酶溶液对细胞壁成分的降解作用。酶液降解后幼叶细胞的原生质体呈绿色。蜗牛酶液从蜗牛(以植物为食)消化腺中提取;果胶酶、纤维素酶从微生物中提取。为了研究不同酶液的酶解效果,某实验小组取无菌烟草幼叶,切成相同大小的小片,等量放入6支试管中,试剂用量和实验结果列于下表。请回答有关问题。
|
试管编号 |
I |
Ⅱ |
Ⅲ |
Ⅳ |
V |
Ⅵ |
|
蒸馏水(mL) |
2 |
O |
1 |
1 |
1 |
1 |
|
缓冲液(mL) |
0 |
2 |
1 |
0.5 |
0.5 |
0.5 |
|
果胶酶液(mL) |
O |
0 |
O |
0.5 |
O |
0 |
|
蜗牛酶液(mL) |
O |
0 |
O |
O |
0.5 |
0 |
|
纤维素酶液(mL) |
0 |
O |
0 |
O |
0 |
0.5 |
|
实验结果 |
- |
- |
- - |
+++ |
++++ |
++ |
(注:“+”越多表示绿色越深,“一”表示颜色无显著变化)
(1)实验过程中,需要轻摇试管,其目的是
,使原生质体从叶小片中游离出来,以便观察悬浮液绿色的深浅。
(2)从绿色的深浅可推测:蜗牛酶液酶解效果最好,原因是蜗牛酶液含有
等多种酶。该实验中
是空白对照组,其设置意义是
。
(3)用网筛过滤原生质体到离心管内,离心后收集沉淀物,并用 洗涤。
(4)原生质体是否有生活力还需进行检验,其检验的方法是 。
3.下表为动植物细胞工程的有关内容比较,你认为错误的有几项
|
比较项目 |
植物组织培养 |
动物细胞培养 |
|
特殊处理 |
酶解法去除细胞壁 |
胰蛋白酶处理制成细胞悬浮液 |
|
基本原理 |
细胞的全能性 |
细胞核的全能性 |
|
典型应用 |
快速繁殖植物 |
建立细胞克隆系 |
|
所属范围 |
个体克隆 |
细胞克隆 |
A.3 B.2 C.1 D.0