在此转基因工程中，是由质粒承担运载体的。要将人的胰岛素基因插入上述质粒切口形成重组质粒必须利用的工具酶是________和________酶。

为了获得人的胰岛素基因通常采用________的方法，通过该方法获得的胰岛素基因与细胞内的胰岛素基因在结构上的区别是________。

大肠杆菌质粒经EcoRI（一种限制性内切酶）切割后所形成的黏性末端之一是，则EcoRI的识别序列和切点是________（切点用箭头标在序列上）。

在将体外重组体DNA导入大肠杆菌体内之前通常要用________处理大肠杆菌，目的是________。

利用大肠杆菌生产人胰岛素必须应用________和________等工程学手段。

为了获得人的胰岛素基因通常采用________的方法，通过该方法合成的胰岛素基因与细胞内的胰岛素基因在结构上的区别是________。

大肠杆菌质粒经EcoRI（一种限制性内切酶）切割后所形成的黏性末端之一是，则EcoRI的识别序列和切点是________（切点用箭头标在序列上）。

要将人的胰岛素基因插入上述质粒切口形成重组质粒必须利用的工具酶是________。