下面是利用大肠杆菌生产人胰岛素的有关问题.请回答: (1) 在此转基因工程中.是由质粒承担运载体的.要将人的胰岛素基因插入上述质粒切口形成重组质粒必须利用的工具酶是和酶. (2) 为了获得人的胰岛素基因通常采用的方法.通过该方法获得的胰岛素基因与细胞内的胰岛素基因在结构上的区别是 . (3) 大肠杆菌质粒经EcoRI切割后所形成的黏性末端� 题目和参考答案——青夏教育精英家教网—

题目内容

下面是利用大肠杆菌生产人胰岛素的有关问题，请回答：

(1)

在此转基因工程中，是由质粒承担运载体的。要将人的胰岛素基因插入上述质粒切口形成重组质粒必须利用的工具酶是________和________酶。

(2)

为了获得人的胰岛素基因通常采用________的方法，通过该方法获得的胰岛素基因与细胞内的胰岛素基因在结构上的区别是________。

(3)

大肠杆菌质粒经EcoRI（一种限制性内切酶）切割后所形成的黏性末端之一是，则EcoRI的识别序列和切点是________（切点用箭头标在序列上）。

(4)

在将体外重组体DNA导入大肠杆菌体内之前通常要用________处理大肠杆菌，目的是________。

答案：
解析：

(1)	限制（性内切）酶,DNA连接酶
(2)	（根据人胰岛素的氨基酸序列）人工合成胰岛素基因,这种人工合成的基因编码区中只含有表达的遗传信息，而没有调控序列（或非编码区和内含子／非编码序列）
(3)	－G^↓GATCC－
(4)	CaCl₂,增大大肠杆菌细胞壁的通透性

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下面介绍的是有关DNA研究的实验：

（1）1952年，赫尔希和蔡斯利用同位素标记完成了著名的噬菌体侵染细菌的实验，下面是实验的部分步骤：

①写出以上实验的部分操作步骤：

第一步：

第二步：

②以上实验结果说明：

（2）用紫外线处理大肠杆菌可诱导产生对T₂噬菌体有抗性的大肠杆菌，这种抗性的产生与其细胞膜上的蛋白质发生变化有关。下图简要示意处理的方法：

T₂噬菌体敏感菌株　　　　　　　　　　　　　　抗T₂噬菌体菌体

①在紫外线的作用下，细菌的膜蛋白改变的根本原因是　　　　　　　。

②如何将图中抗T₂噬菌体菌株从混合菌株中筛选出来？

（3）BrdU是一种嘧啶类似物，能替代胸腺嘧啶与腺嘌呤配对，掺入到新合成的DNA链中。将植物根尖分生组织放在含有BrdU的培养基中培养，待细胞培养两个分裂周期后，取出根尖组织，染色后观察一条染色体的两条姐妹染色单体：发现一条染色单体的两条脱氧核苷酸链中只有一条含有BrdU。预测：另一条染色单体有　　　　　条链含有BrdU，该实验能证明DNA的复制方式为　　　　　　　　　　　　

(江苏省苏州中学08-09学年高三上学期期中考试33)下面是某校生物班同学在“生物技术实践”课中进行的实验，请回答：

（1）在上个世纪50年代，酶已经大规模地应用于各个生产领域，到了70年代又发明了固定化酶与固定化细胞技术。在实际生产中，固定化酶技术的优点是。

与固定化酶技术相比，固定化细胞固定的是酶。在制备固定化酵母细胞的实验中，常用的包埋材料是。

（2）另一同学运用PCR技术，准备对分离得到的大肠杆菌一个DNA分子进行体外扩增。他往扩增仪中加入模板DNA、四种脱氧核苷酸，此外还应加入和。DNA体外扩增过程包括了三个连续的步骤分别是变性、和。

（3）还有同学将大肠杆菌破碎并提取得到大肠杆菌蛋白质，一同学利用琼脂糖凝胶电泳技术将得到的蛋白质进行分离，在电泳过程中，影响蛋白质迁移速度的因素包括蛋白质分子的、以及分子的形状等。而另一位同学则利用凝胶过滤法分离蛋白质（下图），他在操作中加样的正确顺序是。待蛋白质接近色柱底端时，用试管连续收集流出液。先收集到的蛋白质与后收集到的蛋白质的区别是。

下面介绍的是有关DNA研究的实验：

（1）1952年，赫尔希和蔡斯利用同位素标记完成了著名的噬菌体侵染细菌的实验，下面是实验的部分步骤：
①写出以上实验的部分操作步骤：
第一步：
第二步：
②以上实验结果说明：
（2）用紫外线处理大肠杆菌可诱导产生对T₂噬菌体有抗性的大肠杆菌，这种抗性的产生与其细胞膜上的蛋白质发生变化有关。下图简要示意处理的方法：

T₂噬菌体敏感菌株　　　　　　　　　　　　　　抗T₂噬菌体菌体
①在紫外线的作用下，细菌的膜蛋白改变的根本原因是　　　　　　　。
②如何将图中抗T₂噬菌体菌株从混合菌株中筛选出来？（2分）
（3）BrdU是一种嘧啶类似物，能替代胸腺嘧啶与腺嘌呤配对，掺入到新合成的DNA链中。将植物根尖分生组织放在含有BrdU的培养基中培养，待细胞培养两个分裂周期后，取出根尖组织，染色后观察一条染色体的两条姐妹染色单体：发现一条染色单体的两条脱氧核苷酸链中只有一条含有BrdU。预测：另一条染色单体有　　　　　条链含有BrdU，该实验能证明DNA的复制方式为　　　　　　　　　　　　