1975年英国科学家Milestein和Kohler开创了将产生抗体的单个细胞同瘤细胞融合的技术,解决了在体外培养并获得大量纯一的单克隆抗体的难题.如图一所示.阅读下列资料,并回答有关问题:
资料一:B淋巴细胞在体外培养条件下,不能无限大量增殖,故在培养条件下不能存活.瘤细胞在体外培养条件下可以无限传代,是“永生”的细胞.
资料二:细胞合成DNA有“主要合成途径”和“应急途径”(如图二所示).当“主要合成途径”被阻断时,具有次黄嘌呤鸟嘌呤磷酸核糖基转移酶(HGPRT)和胸腺嘧啶核苷激酶(TK)的细胞在主要合成途径被阻断时,可通过应急途径合成DNA,即细胞可利用次黄嘌呤合成嘌呤核苷酸,利用胸腺嘧啶核苷合成嘧啶核苷酸,从而继续合成DNA.骨髓瘤细胞具有正常型和具有次黄嘌呤鸟嘌呤磷酸核糖基转移酶缺陷型(HGPRT-)和胸腺嘧啶核苷激酶缺陷型(TK-),即该细胞不具有HGPRT和TK.
资料三:HAT培养基由次黄嘌呤、氨基喋呤和胸腺嘧啶核苷三种成分组成,简称HAT.氨基喋呤有阻断DNA主要合成途径的作用.

(1)获取小鼠脾细胞(B淋巴细胞)前,需向小鼠腹腔内注射
 
.旋转培养的小鼠骨髓瘤细胞选用
 
(正常型/缺陷型).将脾细胞悬液与瘤细胞混合,离心去掉上清液.迅速向细胞沉淀物中加入
 
促融,静置1分钟,加稀释液终止其促融作用.
(2)①中加入
 
.其作用是
 
.其中,脾细胞不能存活,因为
 
;骨髓瘤细胞也不能存活,因为
 
;只有杂交瘤细胞能存活,因为
 

(3)过程②需检测
 
,筛选出X重复克隆.Y是
 

(4)杂交瘤细胞也可将T淋巴性的淋巴瘤或胸腺瘤同T淋巴细胞融合,产生T淋巴细胞杂交瘤,分泌均一的
 
 0  99588  99596  99602  99606  99612  99614  99618  99624  99626  99632  99638  99642  99644  99648  99654  99656  99662  99666  99668  99672  99674  99678  99680  99682  99683  99684  99686  99687  99688  99690  99692  99696  99698  99702  99704  99708  99714  99716  99722  99726  99728  99732  99738  99744  99746  99752  99756  99758  99764  99768  99774  99782  170175 

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