随着基因工程技术的日臻完善,人类可利用转基因番茄作为生物反应器生产人胰岛素。所用的人胰岛素基因是依据植物“偏爱”的密码子来设计所含的密码子,通过人工合成若干DNA片段,拼接而成,并且在胰岛素-COOH端加上KDEL内质网滞留序列,避免胰岛素在植物细胞中的降解。将该基因置于果实专一性启动子的驱动之下通过农杆菌介导的方法转入番茄中,在番茄的果实中表达人胰岛素。据此回答下列问题
(1)上述基因工程操作是采用___________方法获得目的基因的。获得的人胰岛素基因与人体细胞中胰岛素基因中编码氨基酸的碱基序列不同,但两者所编码的蛋白质中氨基酸序列相同,这是因为_____________________________。要想在体外获得大量该目的基因的片段,可以采用____________技术。该技术中使用的关键酶是________________________ 。
(2)根据上述描述,转基因操作时所用的载体是_____________________,载体上的____________可以转移至受体细胞,并且整合到受体细胞染色体的DNA上。构建的基因表达载体中应含有____________________(从下列选项中选择)。
①目的基因 ②内质网滞留序列   ③果实专一性启动子   ④引物
⑤标记基因    ⑥终止子    ⑦终止密码子   ⑧起始密码
(3)如果要检测在受体细胞中是否存在目的基因可采用___________________技术。该技术中使用的基因探针也可以用来检测________________________ 。

安徽怀远盛产石榴,石榴酒是当地的特产酒,宁夏永宁盛产葡萄,葡萄酒是当地的特产酒,湖南洞庭乃鱼米之乡,家庭擅长米酒酿制。
(1)以上三地家庭酿制当地特产酒时,不必向料中接种酵母菌的是_____________地区。为什么?_____________________________________。某家庭用50斤容量的瓷坛初次酿制30斤葡萄酒,几天后瓷坛塑料封口外鼓,酒香四溢,非常成功。来年信心大增,照去年原样酿制50斤,结果二十几天过去了,仍无什么酒味,塑料封口也不外鼓,原因应是______________________________________。
(2)由于酵母菌直接利用淀粉的能力很弱,科研人员将地衣芽孢杆菌的α-淀粉酶基因转入酵母菌中经筛选得到了可高效利用淀粉的工程酵母菌菌种,过程如图甲所示。

A.图甲中,为达到筛选目的,平板内的固体培养基应以_______________作为唯一的碳源。②③过程需要重复多次,目的是经筛选纯化获得_____________________________。
B.某同学尝试过程③的操作,其中一个平板经培养后的菌落分布如图乙所示。该同学的接种方法是_____________________;推测该同学接种时可能的操作失误是______________________。
C.若要对培养液中的酵母菌进行计数,下表是取0.1ml菌液进行涂布时,不同稀释倍数下统计的平板培养基上的菌落数:

稀释倍数
103
104
105
重 复
实 验
1
1498
125
12
2
1208
135
9
3
1189
130
6
 
根据表中数据估算培养液中的酵母菌的浓度约为__________________个/ml。

 0  85375  85383  85389  85393  85399  85401  85405  85411  85413  85419  85425  85429  85431  85435  85441  85443  85449  85453  85455  85459  85461  85465  85467  85469  85470  85471  85473  85474  85475  85477  85479  85483  85485  85489  85491  85495  85501  85503  85509  85513  85515  85519  85525  85531  85533  85539  85543  85545  85551  85555  85561  85569  170175 

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