基因敲除是根据DNA重组原理发展起来的一门新兴技术。通常用设计好的DNA片段替代动物细胞内的基因片段,从而达到基因敲除的目的。运用基因敲除技术构建基因敲除动物模型是研究基因功能中较为普遍的一种方法,其基本原理如下图所示。

 

 

 

 

 

 

请回答下列问题:

(1)在将目的基因导入受体细胞前,需要构建一个基因表达载体。一个理想的基因表达载体,通常由启动子、终止子、目的基因和    ▲     等四部分组成。在此过程中,所需使用的相关工具酶是       ▲         

(2)如果要获得一只含目的基因的小鼠,则选择的受体细胞通常为      ▲     ,基因导入该细胞时,可以采用        ▲         等方法。

(3)上述途径所获得的动物,其后代并非每一个个体都含目的基因,原因是  ▲  

(4)假设通过基因敲除构建了一个非球形红细胞性贫血(Ⅱ型)模型动物,该动物因丙酮酸激酶缺陷或葡萄糖-6-磷酸脱氢酶(G-6-PD)缺陷,使红细胞膜变化引起红细胞自溶现象,但若向该动物注射ATP后,自溶现象可明显降低。由此可表明,基因对生物性状的控制方式之一是:         ▲       

(5)某实验小组向正常小鼠胚胎细胞内导入某“X基因”后,发现靶基因能正常转录

形成mRNA,但细胞内却不再合成相应蛋白质,其原因最可能是      ▲    

 

 萌发的禾谷类种子中淀粉酶的含量显著增高,主要有α-淀粉酶和β-淀粉酶。α-淀粉酶不耐酸、较耐热,在pH为3.6、0℃下可迅速失活,而β-淀粉酶耐酸、不耐热,在70℃条件下15min后失活。根据它们的这种特性,可分别测定一种酶的催化效率。某实验小组进行了“提取小麦种子中α-淀粉酶并测定α-淀粉酶催化淀粉水解的最适温度”等相关实验。

实验材料:萌发3天的小麦种子(芽长约1cm)。

主要试剂及仪器:1mg/mL的标准麦芽糖溶液、5%的可溶性淀粉溶液、碘液、蒸馏水、石英砂、恒温水浴锅等。

实验步骤:

 

步骤一:制备酶溶液。

 

 

 


步骤二:略。

步骤三:取 6支干净的、体积相同并具刻度的试管依次编号,按下表要求加入试剂,再观察各试管内的颜色变化(注:+表示碘液变蓝色,-表示碘液不变色)。

试管编号

1

2

3

4

5

6

5%的可溶性淀粉溶液(mL)

8

8

8

8

8

8

恒温水浴5min(℃)

0

20

40

60

80

100

α-淀粉酶保持活性而β-淀粉酶失去活性的溶液 (mL)

1

1

1

1

1

1

恒温水浴5min(℃)

0

20

40

60

80

100

溶液混合,振荡后恒温水浴5min(℃)

0

20

40

60

80

100

加入碘液,振荡后观察颜色变化

+++

++

+

-

++

+++

请回答下列问题:

(1)资料表明:小麦种子发芽时,胚产生赤霉素,赤霉素扩散到糊粉层,诱导淀粉酶的合成。赤霉素诱导淀粉酶合成的主要机理是           。选用萌发的小麦种子提取酶液的主要理由是          

(2)步骤二的具体操作是                   ▲                           

(3)加入碘液,振荡后观察颜色变化,发现试管4中碘液不变色,能否据此推断α-淀粉酶的最适合温度一定是60℃?     ▲   。理由是           ▲             。该实验中不能选用斐林试剂检测实验结果的主要原因是        ▲             

(4)若要进一步研究小麦种子中β-淀粉酶的最适温度,则需获得β-淀粉酶保持活性而α-淀粉酶失活的酶溶液。请简要写出制备该种酶溶液的方法:

                                    

 

 

 

 

 0  64920  64928  64934  64938  64944  64946  64950  64956  64958  64964  64970  64974  64976  64980  64986  64988  64994  64998  65000  65004  65006  65010  65012  65014  65015  65016  65018  65019  65020  65022  65024  65028  65030  65034  65036  65040  65046  65048  65054  65058  65060  65064  65070  65076  65078  65084  65088  65090  65096  65100  65106  65114  170175 

违法和不良信息举报电话:027-86699610 举报邮箱:58377363@163.com

精英家教网