PCR技术是一种DNA的扩增技术,操作步骤简介如下:

第一步:准备反应式溶液和模块DNA。

A.配制聚合酶链式反应溶液:

配方:按如下比例进行配制:蒸馏水100、缓冲溶液15、氯化镁溶液8、引物13、引物23、DNA聚合酶、矿物油1(防止聚合酶在冻结时受伤害);dATP、dGTP、dCTP、dTTP每一种各加5。

B.准备要拷贝的DNA:

提取准备要拷贝的DNA

(如可以用一牙签轻刮口腔内壁,将牙签放入蒸馏水中摇动。加热蒸馏水沸腾,使细胞破碎放出DNA。用离心机离心后,去除蒸馏水中较大的细胞碎片。这时上清液中就有了较纯的DNA。)

第二步:聚合酶链式反应。

①将要拷贝的DNA“B”放入反应液“A”中。

②水浴加热。首先,94 ℃,使DNA双螺旋解旋,历时1 min;然后,56 ℃,使引物结合到DNA上,历时90 s;最后,72 ℃,用聚合酶使DNA拷贝,历时90 s。③重复步骤②。每重复一次,即完成一次拷贝。

分析回答下列问题:

(1)以上材料可以说明(  )

A.DNA的复制必须在活细胞内才能完成

B.DNA能指导蛋白质的合成

C.在合适的条件下,非细胞环境也能进行DNA复制

D.PCR技术是一种无性生殖技术

(2)为什么要加入两种引物。________________________________________________________________________

________________________________________________________________________。

引物的作用是什么?________________________________________________________________________

________________________________________________________________________。

(3)PCR技术中用到的DNA聚合酶,取自生长在温泉中的一种细菌,就PCR技术来讲,你认为使用这种细菌中提取的酶较普通的动植物体内提取的DNA聚合酶的优势是________________________________________________________________________

________________________________________________________________________。

 

回答下列关于微生物和酶的问题。

环境污染物多聚联苯难以降解,研究发现联苯降解菌内的联苯水解酶是催化多聚联苯降解的关键酶。

(1)下列培养基中能有效分离联苯降解菌的是________________________________________________________________________,

原因是________________________________________________________________________。

A培养基(g/L):某生长因子2.0,(NH4)2SO42.0,K2HPO43.0,MgSO41.0,pH 7.4,多聚联苯50 mL

B培养基(g/L):牛肉膏10.0,蛋白胨20.0,葡萄糖20.0,NaCl 5.0,pH 7.4

C培养基(g/L):某生长因子2.0,淀粉20.0,NH4NO32.5,MgCl20.5,K2HPO43.0,多聚联苯50 mL,pH 7.4

进一步研究发现,不同的金属离子对联苯水解酶的活性有一定影响,结果见下表:

 

金属离子(mmoL/L)

相对活性(%)

对照组

100

Mn2

123

Co2

79

Mg2

74

 

(2)依据表中结果,金属离子________对该酶的活性有一定的促进作用。金属离子对酶的活性有促进或抑制作用,可能的原因是________________________________________________________________________。

(3)通过酶工程可将联苯水解酶用于生产实践。酶工程通常包括酶的生产、________、酶的固定化和酶的应用等方面。酶固定化的好处是________________________________________________________________________。

(4)下图实线表示联苯水解酶催化的反应速度与酶浓度的关系,虚线表示在其他条件不变的情况下,底物浓度增加一倍,反应速度与酶浓度的关系,能正确表示两者关系的是________。

(5)红球菌和假单孢菌都能降解多聚联苯,但研究发现以每克菌体计算,两种菌降解多聚联苯的能力有所不同,对此现象合理的假设是______________或____________

 

 0  48169  48177  48183  48187  48193  48195  48199  48205  48207  48213  48219  48223  48225  48229  48235  48237  48243  48247  48249  48253  48255  48259  48261  48263  48264  48265  48267  48268  48269  48271  48273  48277  48279  48283  48285  48289  48295  48297  48303  48307  48309  48313  48319  48325  48327  48333  48337  48339  48345  48349  48355  48363  170175 

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