Question

PCR技术是一种DNA的扩增技术，操作步骤简介如下：

第一步：准备反应式溶液和模块DNA。

A．配制聚合酶链式反应溶液：

配方：按如下比例进行配制：蒸馏水100、缓冲溶液15、氯化镁溶液8、引物13、引物23、DNA聚合酶、矿物油1(防止聚合酶在冻结时受伤害)；dATP、dGTP、dCTP、dTTP每一种各加5。

B．准备要拷贝的DNA：

提取准备要拷贝的DNA

(如可以用一牙签轻刮口腔内壁，将牙签放入蒸馏水中摇动。加热蒸馏水沸腾，使细胞破碎放出DNA。用离心机离心后，去除蒸馏水中较大的细胞碎片。这时上清液中就有了较纯的DNA。)

第二步：聚合酶链式反应。

①将要拷贝的DNA“B”放入反应液“A”中。

②水浴加热。首先，94 ℃，使DNA双螺旋解旋，历时1 min；然后，56 ℃，使引物结合到DNA上，历时90 s；最后，72 ℃，用聚合酶使DNA拷贝，历时90 s。③重复步骤②。每重复一次，即完成一次拷贝。

分析回答下列问题：

(1)以上材料可以说明（　　）

A．DNA的复制必须在活细胞内才能完成

B．DNA能指导蛋白质的合成

C．在合适的条件下，非细胞环境也能进行DNA复制

D．PCR技术是一种无性生殖技术

(2)为什么要加入两种引物。________________________________________________________________________

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引物的作用是什么？________________________________________________________________________

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(3)PCR技术中用到的DNA聚合酶，取自生长在温泉中的一种细菌，就PCR技术来讲，你认为使用这种细菌中提取的酶较普通的动植物体内提取的DNA聚合酶的优势是________________________________________________________________________

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Answer 1

【答案】

（1）C  （2）DNA分子两条链是呈反向平行的，DNA聚合酶不能从头合成DNA分子，只能从3’端到5’端延伸，而引物也是一段核苷酸序列，与DNA分子双链中的一条链互补可以引导DNA分子的复制

（3）较高温下不会变性失活

【解析】

试题分析：（1）PCR说明在体外也能将DNA进行大量复制，故选C。

（2）PCR过程DNA聚合酶的作用是将游离的脱氧核苷酸加到DNA片段上，不能从头合成DNA分子，故必须需要一段引物，引物是一段核苷酸序列，与DNA分子双链中的一条互补链互补，可以引导DNA分子的复制。

（3）PCR因为需要在高温下变性，这种酶耐高温，与普通酶相比在较高温下不会变性失活。

考点：本题考查PCR相关知识，意在考察考生对知识点的理解掌握和把握知识点间内在联系综合运用能力。