1．(14分)(2012·郑州三模)请回答下列有关微生物的一些问题。

(1)微生物的分布：微生物主要分布在富含________的土壤表层；不同微生物对pH的要求不同，细菌常生活在酸碱度________的潮湿土壤中。

(2)微生物的消毒和灭菌：在菊花组织培养中，对外植体常用酒精和________进行消毒。在微生物培养中，对培养基常用________方法进行灭菌。对于空气中的细菌可用紫外线杀灭，其原因是紫外线能使蛋白质变性，还能________。如果要检测灭菌是否彻底，可以采用的方法是：________________________________________________________________

________________________________________________________________________。

(3)微生物的应用：在葡萄酒的自然发酵过程中，运用吸附在葡萄皮上的野生酵母菌发酵产生酒精，请写出该过程的化学反应式：____________________。在果醋制作时，运用醋酸菌在________和糖源充足时，将糖分解成醋酸。

(4)微生物的接种：微生物接种的方法很多，最常用的是____________和____________。

(5)微生物的计数：根据培养基上出现的菌落数目和稀释倍数计算得出细菌数目往往比实际的数目低，原因是______________。

(6)微生物的鉴定：为检测尿素分解菌的存在与否，在以尿素为唯一氮源的________(选择、鉴别)培养基中加入________指示剂，如果存在尿素分解菌，则指示剂将变________色。

10．(10分)(2012·江苏南通模拟)下图表示利用胚胎干细胞(ES细胞)所做的一系列研究，请据图分析回答：

(1)过程Ⅰ将胚胎干细胞置于γ射线灭活的鼠胎儿成纤维细胞的滋养层上，并加入动物血清、抗生素等物质，维持细胞不分化的状态。在此过程中，滋养层提供干细胞增殖所需的______________，加入抗生素是为了________________，这对于研究细胞分化和细胞凋亡的机理具有重要意义。

(2)过程Ⅱ将带有遗传标记的ES细胞注入早期胚胎的囊胚腔，通过组织化学染色，用于研究动物体器官形成的时间、发育过程以及影响的因素，这项研究利用了胚胎干细胞具有______________的特点。在哺乳动物发育过程中，囊胚的后一个阶段是__________。

(3)过程Ⅱ中目的基因导入胚胎干细胞最常用的方法是____________。将目的基因转入胚胎干细胞前须构建基因表达载体，其目的是________________________________________________________________________________________________________________________________________________。

(4)过程Ⅳ得到的小鼠畸胎瘤中全是软骨、神经管、横纹肌和骨骼等人类组织和器官。实验时，必须用X射线照射去除胸腺的小鼠，获得免疫缺陷小鼠，其目的是________________________________________________。该过程研究的意义在于解决_____________________________问题。

9．(13分)(2012·陕西宝鸡质量检测二)克隆羊的成功轰动世界，它不仅奠定了疾病克隆性治疗的基础，还解决了器官移植中供体不足的问题，同时也给人类带来了一些过去尚未遇到的问题。图为人类对克隆技术的拓展图和应用。请据图回答问题。

(1)图中所涉及的现代生物技术有__________和________________、______________等。

(2)下列有关胚胎移植的叙述正确的有________。

A．冲卵指的是从子宫中冲出胚胎，而非冲出卵子

B．只有供、受体生理环境高度一致，移入受体的胚胎才能被接受，并继续发育

C．供体和受体要进行免疫检查，防止发生免疫排斥反应

D．不同动物其胚胎移植的时间不同，人的胚胎移植最好在四细胞阶段进行

(3)图中两个婴儿长大后，外貌、性格和其他特征与原型男人相同，这说明____________具有全能性。

(4)使用培养基进行胚胎干细胞培养时，通常要加入__________等天然成分，除了保证被培养细胞处于无菌、无毒及充足氧气的环境中，还需要保证细胞生活所需的______________；早期胚胎发育在____________阶段以前的细胞是全能细胞。

(5)图中从“内细胞团到胚胎干细胞”的培养过程中，必须用________________处理内细胞团，使之分散成单个细胞。干细胞形成组织、器官必须要进行__________和__________。

(6)在体外培养胚胎干细胞能否获得动物器官？______。为什么？________________________________________________________________________________________________________________________________________________。

8．(12分)(2011·山东理综)胚胎工程是一项综合性的动物繁育技术，可在畜牧业和制药业等领域发挥重要作用。下图是通过胚胎工程培育试管牛的过程。

 (1)从良种母牛采集的卵母细胞，都需要进行体外培养，其目的是__________；从良种公牛采集的精子需__________后才能进行受精作用。

(2)在体外培养受精卵时，除了给予一定量的O₂以维持细胞呼吸外，还需要提供__________气体以维持__________。

(3)图中过程A称为__________，它在胚胎工程中的意义在于________________________________________________________________________。

(4)研制能够产生人类白细胞介素的牛乳腺生物反应器，需将目的基因导入牛受精卵，最常用的导入方式是__________；获得转基因母牛后，如果______________________即说明目的基因已经表达。

7．(7分)下图为细胞融合的简略过程，据图回答相关问题。(　　)

(1)若a、b分别是基因型为Hhrr、hhRr两个烟草品种的花粉，且这两对基因分别位于两对同源染色体上。由于一对隐性纯合基因(rr或hh)的作用，在光照强度大于800 lx时都不能生长。要想从融合细胞的培养液中分离出基因型为HhRr的杂种细胞，较为简便的筛选方法是________________________________________________________________________________________________________________________________________________。

(2)若a、b表示两种植物体细胞，则由d细胞形成杂交植株的原理是___________________________________________________________________________________________，这种育种方法的优点是________________________________________________________________________。

(3)若a、b分别为骨髓瘤细胞和B淋巴细胞，则d细胞的特点是______________________________________________________________________________________________。由d细胞产生的抗体与普通血清抗体相比较，具有________________________的特点。生产上一般不能通过直接培养B淋巴细胞的方法生产单克隆抗体的主要原因是___________________________。

(4)下列各图表示单克隆抗体制备过程的各阶段图解，请用箭头把代表各图解的字母按单克隆抗体的制备过程的顺序连接起来。顺序是__________。

6．(8分)甲流(H1N1)在世界各地大面积蔓延，有些国家还出现了死亡病例。科学家已经分离出H1N1病毒(一种RNA病毒)。某制药厂根据下面流程图生产预防和治疗甲流的抗体，请据图回答有关问题：

(1)若A细胞是小鼠骨髓瘤细胞，则B细胞是取自感染病毒的人体内的______细胞，促进d过程的常用诱导剂是________________。

(2)假设仅考虑某两个细胞的融合，则可形成__________种类型的C细胞，因此需用培养基筛选出________________(填特点)的D细胞用于培养。D细胞的名称是______________。

(3)理论上，注射了抗体的人不能长期对甲流免疫，试分析原因：________________________________________________________________________________________________________________________________________________。

(4)不同种动物的体细胞融合，相比诱变育种和杂交育种方法，具有________________________等突出的优点。

(5)请说明单克隆抗体的主要作用______________________________。

5．(11分)请回答：

(1)植物微型繁殖技术属于植物组织培养的范畴。该技术可以保持品种的__________，繁殖种苗的速度__________。离体的叶肉细胞在适宜的条件下培养，最终能够形成完整的植株，说明该叶肉细胞具有该植物的全部__________。

(2)把试管苗转到新的培养基上时，需要在超净工作台上进行，其原因是避免__________的污染。

(3)微型繁殖过程中，适宜浓度的生长素单独使用可诱导试管苗__________，而与__________配比适宜时可促进芽的增殖。若要抑制试管苗的生长，促使愈伤组织产生和生长，需要使用的生长调节剂是__________(脱落酸、2，4D)。

(4)将某植物试管苗培养在含不同浓度蔗糖的培养基上一段时间后，单株鲜重和光合作用强度的变化如图。据图分析，随着培养基中蔗糖浓度的增加，光合作用强度的变化趋势是__________，单株鲜重的变化趋势是____________。据图判断，培养基中不含蔗糖时，试管苗光合作用产生的有机物的量______(能、不能)满足自身最佳生长的需要。

(5)据图推测，若要在诱导试管苗生根的过程中提高其光合作用能力，应______(降低、增加)培养基中蔗糖浓度，以便提高试管苗的自养能力。

4．(12分)(2012·江西南昌一模)人绒毛膜促性腺激素(HCG)是女性怀孕后胎盘滋养层细胞分泌的一种糖蛋白，制备抗HCG单克隆抗体可用于早孕的诊断。图是抗HCG单克隆抗体制备流程示意图，请分析回答：

(1)制备单克隆抗体过程中要用到________和________技术。

(2)在B淋巴细胞内DNA合成有D和S两条途径，其中D途径能被氨基嘌呤所阻断。而骨髓瘤细胞的DNA合成没有S途径。

①利用DNA合成途径不同的特点配制的HAT培养基含有多种成分，其中添加的________成分具有筛选杂交瘤细胞的作用。

②最终筛选获得的杂交瘤细胞的特点是________。

③培养杂交瘤细胞的条件包括：无菌、无毒的环境、营养、________、________。

(3)哺乳动物在怀孕初期能为胚胎的收集提供可能，这是因为__________________________________；在胚胎移植技术中收集到胚胎后要进行________、________以及移植后的检查等步骤；胚胎移植时可利用激素对受体进行________处理，使受体处于适合的生理状况；此外，受体对移入子宫的外来胚胎基本上不发生________反应，为胚胎在受体内的存活提供了可能。

(4)为了更多地生产出人HCG，有人构思采用胚胎分割技术，把一个胚胎分割成很多份数，进而培育出大量相同的转基因牛。你认为这种方法可行吗？为什么？

________，_________________________________。

3．(8分)(上海卷)分析有关基因表达的资料，回答问题。取同种生物的不同类型细胞，检测其基因表达，结果如图。

(1)基因1～8中有一个是控制核糖体蛋白质合成的基因，则该基因最有可能是基因______。

(2)上图所示细胞中功能最为近似的是细胞______。

A．1与6　　　　　　　　      B．2与5

C．2与3                                   D．4与5

(3)判断图中细胞功能近似程度的依据是____________________。

(4)现欲研究基因1和基因7连接后形成的新基因的功能，导入质粒前，用限制酶切割的正确位置是______。

(5)如图是表达新基因用的质粒的示意图，若要将新基因插入到质粒上的A处，则切割基因时可用的限制酶是______。

A．HindⅢ                                 B．EcoRⅠ

C．EcoB                                     D．PstⅠ

(6)新基因与质粒重组后的DNA分子导入受体细胞的概率很小，因此需进行______，才能确定受体细胞已含有目的基因。

(7)在已确定含有目的基因的受体细胞中，若质粒的抗青霉素基因缺失了两个碱基，将这样的受体细胞接种到含有青霉素的培养基上，该细胞中可能出现的结果是______(多选)。

A．抗青霉素基因不能转录      B．基因1和7没有表达

C．基因1和7不能连接         D．质粒上的酶切位置发生改变

2．(9分)(2012·江西盟校二联)马铃薯是种植广泛的农作物，病毒侵染后导致产量大幅下降，培育脱毒和抗毒的马铃薯品种是提高产量的有效方法。请分析并回答。

(1)马铃薯茎尖病毒极少甚至无病毒，因此可将马铃薯茎尖接种在培养基中，培养基中添加生长素和细胞分裂素，诱导离体细胞经过________和________完成组织培养过程，从而形成脱毒苗。此过程说明植物细胞具有________。

(2)为获得抗病毒的马铃薯植株，往往采用转基因技术，将病毒复制酶基因转移到马铃薯体内。其过程大致如下图所示。

①上述过程中，将目的基因导入马铃薯细胞使用了________法。该方法先将目的基因插入到农杆菌Ti质粒的________上，然后通过农杆菌的转化作用，使目的基因进入植物细胞并插入到植物细胞的________上。导入农杆菌时，首先要构建基因表达载体，这里需要的工具酶有________________，还要用________处理土壤农杆菌，使之转变为感受态，然后将它们在缓冲液中混合培养以完成转化过程。

②该转基因马铃薯产生的配子中________(填“一定”或“不一定”)含有目的基因。