(09汉沽一中第六次月考)(生物技术实践,15分)

(1)PCR(聚合酶链式反应)技术在生物工程中相当重要。请简述.PCR扩增目的基因的基本过程。

(2)制备培养基方法:将蛋白胨、NaCl和牛肉膏放人烧杯内,加200mL蒸馏水,用玻璃棒搅匀后,在酒精灯上加热。当蛋白胨、牛肉膏融化后,加入琼脂,用微火继续加热至琼脂溶化,补充水至200Ml。用0.1mol/L。的NaOH或0.1mol/L的HCl将pH调至7.0--7.2,分别对培养基和培养皿进行高压蒸汽灭菌。当培养基的温度下降到50℃时,将其分装在5套培养皿中,在酒精灯附近倒平板,当培养基冷却至室温,按下表分别进行处理。将处理完毕的培养基置于35℃的温度下培养2~3天,观察每个培养基中的细菌生长情况。请回答下列问题:

  第1套

开盖,在空气中暴露10s

  第2套

用手指接触培养基约10s

  第3套

用硬币接触培养基约10s

  第4套

用滤纸擦一下课桌,再接触培养基约10s

  第5套

(不打开盖)

①上述实验中有哪些是无菌操作              

②第5套培养皿的作用是               。如果其培养基表面有菌落生长,说明了                         

③在1到4套的培养基中都出现了不同形态的菌落,原因是              。能否说菌落的形态越多,用来接触的物体吸附的细菌数目就越多,为什么?

④实验中,有三处特别强调温度控制,请简要说明其控制温度的科学道理。

“高压蒸汽灭菌后培养基的温度下降到50℃”才倒平板:                        

“当培养基冷却至室温,按下表分别进行处理”:                               

“将处理完毕的培养基置于35%的温度下培养”:                              

 

(09汉沽一中第六次月考)(10分)癌症又称为恶性肿瘤,是在各种致癌因子的作用下,细胞生长与增殖的调控发生严重紊乱的结果。阅读下列有关细胞癌变的资料,回答下列问题:

资料一:从膀胱癌细胞中分离导致细胞癌变的ras基因,将其与正常细胞相应的DNA片段比较,癌变的ras基因有一个碱基对发生了变化,使原癌基因控制编码第12个氨基酸的密码子GCC(甘氨酸)变成了GUC(缬氨酸)。这种突变ras的肿瘤蛋白,能持续促进细胞增殖。

资料二:基因拷贝数的增加叫做基因扩增。细胞中c―myc基因编码的c―myc蛋白具有开启调节细胞周期的基因转录的功能。如果由于某种原因导致c―myc基因的扩增, 合成了过多的c―myc蛋白,这样将使调节细胞周期的基因持续转录,导致细胞快速增殖。

资料三:Burld淋巴瘤细胞中,c-myc基因位于8号染色体上,当其易位到14号染色体特定位点时,其转录活性增加了5―10倍,基因表达产物过量,使淋巴细胞发生 癌变。

(1)细胞癌变的分子基础是细胞内的             发生了改变,从而使它成为具有             特性的细胞。癌细胞的主要分裂方式是               

(2)资料一中,膀胱癌细胞中激活的ras基因与正常基因比较,发生突变的碱基对是                        。(用碱基符号表示)

(3)以资料二中c―myc基因为例,说明基因表达的过程。

(4)有人认为原癌基因突变是引发癌变的唯一途径。你认同这个观点吗?请(举例)说明理由。

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