【题目】质粒P含有氨苄青霉素抗性基因(Ampr)和四环素抗性基因(Tetr),外源DNA的插入会导致插入部位基因的失活。重组人干扰素a-1b是我国第一个国内批准生产的基因工程药物。下图所示为利用质粒P和人干扰素基因构建基因表达载体P1的示意图。回答下列问题:
限制酶 | EcoR V | Sau3AI | BamH I |
识别序列及切割位点 |
(1)据图分析,为便于过程①所获得的目的基因片段能够顺利与质粒P连接,需要在目的基因片段加上__________序列。成功导入P1的受体菌落具有的抗药性特点为__________。
(2)过程③用到的酶为__________。为了保证目的基因能够正常表达,在构建P1时需要将目的基因插入__________之间。
(3)科学家最早就是利用基因工程方法在大肠杆菌和酵母菌细胞内获得了干扰素,利用大肠杆菌作为受体菌的优点是____________________。以大肠杆菌为受体细胞时通常用人特定细胞的mRNA为材料来获得cDNA,其原理是______________________________。
(4)若要检测是否表达出干扰素,可用__________(物质)对工程菌中提取的蛋白质进行检测。