【题目】先导编辑技术是利用经过改造的Cas9蛋白,在基因组中的特定位点切断DNA,随后逆转录酶在RNA链的引导下在切断处进行基因编辑,其能实现更精准地对DNA进行编辑,该过程流程如图所示。该技术可以实现基因的定点突变和整合,将修饰好的基因导入胚胎干细胞,治疗人类某些单基因遗传病。

1)基因重组技术工具中的_______酶与先导编辑工具中Cas9蛋白作用相似,但二者的不同之处是前者____________________________________________________________

2)下图为由经过修饰的pku基因构建的重组载体,在转化胚胎干细胞时,只有重组载体中整合区域正确整合到胚胎干细胞染色体DNA上才表示转化成功,而重组载体的其他区域将被靶向分解。在转化中会出现错误整合,整合错误才会出现重组载体中的两个HSV-tk中至少会有一个与neor一起整合到染色体DNA上而不被分解。已知含有标记基因neor的细胞具有G418的抗性。HSV-tklHSV-tk2的产物都能把DHPG转化成有毒物质而使细胞死亡。

①题干中的胚胎干细胞可以来自_____________________________,利用胚胎干细胞为受体细胞是因为其功能上具有________________________

②胚胎干细胞在体外培养时需要满足的条件除一定的气体环境、充足营养、适宜的温度和PH外,还应保证____________条件,气体环境中的CO2的作用是_____________________

③转化后的各类胚胎干细胞要依次在含有G418____________________的培养液中培养,在双重选择下存活并增值的是正确整合的胚胎干细胞,原因是________________________________________

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