【题目】鸡干扰素是一种具有高效和广谱抗病毒作用的细胞因子,广泛用于动物领域的抗病毒治疗。科研人员将鸡干扰素基因作为目的基因,构建基因表达载体,通过农杆菌介导法导入烟草,以获得抗病毒烟草。下图为科研人员制备能合成鸡干扰素的烟草愈伤组织细胞的流程,①~④表示相关的操作,两种限制酶的识别序列及切割位点如表所示。请回答下列问题:

1)步骤①中,利用PCR技术扩增干扰素基因时,设计引物序列的主要依据是__________。科研人员还在两种引物的一端分别加上了____________________序列,以便于后续的剪切和连接,一个DNA分子三轮复制以后,含有两种引物的DNA分子有__________个。为防止酶切产物自身环化,构建表达载体需用两种限制酶,选择的原则是__________

A. Ti质粒内,每种限制酶只有一个切割位点

B. 目的基因编码蛋白质的序列中,每种限制酶只有一个切割位点

C. 酶切后,目的基因形成的两个黏性末端序列不相同

D. 酶切后,Ti质粒形成的两个黏性末端序列相同

2)步骤②所构建的基因表达载体中未标注出的必需元件还有__________,步骤③中需先用__________处理农杆菌以便将基因表达载体导入细胞。

3)步骤④中,科研人员提取愈伤组织细胞的RNA后,先通过__________获得DNA,再进行PCR扩增,若最终未能检测出干扰素基因,其可能原因是__________

 0  168847  168855  168861  168865  168871  168873  168877  168883  168885  168891  168897  168901  168903  168907  168913  168915  168921  168925  168927  168931  168933  168937  168939  168941  168942  168943  168945  168946  168947  168949  168951  168955  168957  168961  168963  168967  168973  168975  168981  168985  168987  168991  168997  169003  169005  169011  169015  169017  169023  169027  169033  169041  170175 

违法和不良信息举报电话:027-86699610 举报邮箱:58377363@163.com

精英家教网