【题目】利用转基因的工程菌生产药用蛋白,近些年在我国制药行业中异军突起。图1表示基因工程常用的一种质粒。
回答有关问题:
(1)SphⅠ和SacⅠ两种限制酶识别并切割不同的DNA序列,将目的基因和质粒都通过SphⅠ和SacⅠ切割,可以避免_______________。拼接成重组质粒,需要加入_______________酶才能完成。
(2)各限制酶在该质粒上分别只有一处识别序列,有关质粒和重组质粒的限制酶酶切片段长度如下表所示。已知质粒被切除的片段长度为0.5kb,则与质粒结合的目的基因长度为_____
kb。质粒上ClaⅠ与PstⅠ区域之间的长度为2.4kb(图1所示),结合图2分析目的基因上ClaI、PstⅠ两种限制酶的切割位点分别为___________(填“a和b”或“b和a”)。
质粒 | 重组质粒 | |
BglⅡ | 6.0kb | 7.1kb |
ClaⅠ | 6.0kb | 2.3kb, 4.8kb |
PstⅠ | 6.0kb | 1.5kb, 5.6kb |
(3)在筛选导入重组质粒的受体菌时,培养基中加入适量的________________,使导入重组质粒和普通质粒的受体菌都能在该培养基上生长。为了进一步筛选,可以利用抗原-抗体杂交的方法,若出现______________,则该受体菌可以作为工程菌。
(4)若要对药用蛋白的结构进行改造,可利用____________工程对目的基因进行修饰。