【题目】P450是石油降解的关键酶,用SalⅠ和NdeⅠ联合酶切获得的P450基因,与下图所示的质粒(pCom8)重组,导入土著菌种Y9,获得了基因工程菌P450/Y9。图中mel是黑色素合成基因,该基因表达能使白色的菌落变成黑色,aacCl是庆大霉素(一种抗生素)抗性基因,限制酶NdeⅠ、XhoⅠ和SspⅠ在该质粒上均只有一个酶切位点。下表表示几种限制酶的识别序列和切割位点,据图回答下列问题:

限制酶

Sal

Nde

Xho

Ssp

识别序列及切割位点

1)构建pCom8重组质粒时,需要用__________________________(限制酶)对图示质粒进行处理,才能与__________________________DNA连接酶的作用下形成重组质粒。基因工程中用两种不同的限制酶切割目的基因和质粒,获得不同的黏性末端的主要目的是防止_________________________和反向连接。

2)为了扩增重组质粒,需将其转入用__________预先处理的土著菌种Y9中,提高质粒导入率,以便获得更多基因工程菌P450/Y9。为了筛选出转入了重组质粒的基因工程菌P450/Y9,应在筛选平板培养基中添加______________。作为载体的质粒除了含有标记基因,还应该含有____________________(至少写两个)。

3)为检测基因工程菌降解石油能力的大小,可观测的指标是____________________________。土著菌种Y9不能降解石油,但转入上述构建好的表达载体后则获得降解石油的能力,这是因为________________

 0  167872  167880  167886  167890  167896  167898  167902  167908  167910  167916  167922  167926  167928  167932  167938  167940  167946  167950  167952  167956  167958  167962  167964  167966  167967  167968  167970  167971  167972  167974  167976  167980  167982  167986  167988  167992  167998  168000  168006  168010  168012  168016  168022  168028  168030  168036  168040  168042  168048  168052  168058  168066  170175 

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