【题目】水稻是世界上最重要的粮食作物之一,是全球约半数人口的主粮。然而水稻只有在磷营养充足的条件下才能保证高产。S基因是番茄线粒体中的磷转运蛋白基因,科研人员将S基因转入水稻体内,以期望获得低磷条件下的高产水稻。操作流程如下:

1)磷是构成____等物质的重要组成元素。土壤溶液中的磷浓度一般不超过2×10-12 mol/L,而植物细胞内的磷浓度却大于10×10-4 mol/L,因此植物从土壤中吸收磷的方式是____

2)提取番茄细胞的总RNA经过____得到的cDNA,用限制酶处理后与载体结合并转入受体菌体内,建立番茄的_____,从中获取S基因。但此途径得到的S基因两端没有限制酶识别序列,利用____技术添加相应序列并扩增。已知Ti质粒转录方向为顺时针,相关酶切位点如下表。


通过测序已知S基因部分序列如下:

请补充扩增结束后,大多数DNA片段的碱基对序列____________

3)构建含S基因的表达载体时,通常用两种限制酶切割含S基因的DNA片段和Ti质粒,限制酶作用部位为____(填化学键名称)。将重组Ti质粒转入农杆菌时,可以用____处理农杆菌,使得表达载体易于导入。为了使S基因能够正确表达,还应插入的元件是什么_________(请在下图中画出并标注元件名称)。

4)将表达载体导入农杆菌以及农杆菌与水稻愈伤组织共培养时需要进行筛选,这两步骤的培养基中都需要加入____,以筛选出成功导入表达载体的农杆菌和水稻愈伤组织。

5GUS基因的产物能催化无色物质K呈现蓝色。经无色物质K处理愈伤组织并筛选出了呈现蓝色的组织,说明____

6)农杆菌Ti质粒上的____序列,可以从农杆菌中转移并随机插入到被侵染植物细胞的____中。随机挑选三个转基因株系甲、乙、丙进行阳性检测试验。分别提取每个样品的基因组,利用限制酶进行酶切电泳验证,结果如下图所示,

甲、乙、丙转基因植株中分别被转入了____S基因。

7)通过盆栽转基因株系,分别在低磷条件下和磷正常条件下测定____以验证转入S基因是否能达到目的。测定结果如下图。

结果显示____,从而说明低磷条件下,S基因可以调控转基因水稻对磷的吸收与积累,提高转基因水稻产量。

8)本实验的研究价值在于____

【题目】牛支原体是严重危害牛养殖业的一种病原菌,它能引起肺炎、关节炎等多种疾病。VspX蛋白是牛支原体表面的一种脂蛋白,在牛支原体感染宿主细胞时起黏附作用。科研人员制备抗VspX单克隆抗体,并进行相关研究。

1)将等量的纯化VspX蛋白作为_________分别注射到5只小鼠体内,经过二次免疫后测定小鼠抗VspX抗体的免疫效果,取其中免疫效果最好的1号小鼠用于后面的融合实验。

2)在融合前三天,对1号小鼠加强免疫一次,目的是__________。然后取小鼠的脾脏细胞用_________试剂诱导与骨髓瘤细胞融合,用选择培养基进行筛选得到__________

3)一段时间后,将(2)所得细胞接种到多孔培养板上,进行抗体阳性检测,检测原理如下图。

在检测时需要将VspX蛋白固定于固相载体表面制成_________,并加入多孔板培养槽中的_________(细胞、上清液),即待测样本。

②加入酶标抗体后一段时间,需要用洗涤剂将未与_________结合的酶标抗体洗去。

③加入相应酶促反应底物显色后,颜色的深浅可代表_________

4)将上述细胞经_________酶处理,制成细胞悬液,除添加一般营养物质外,还需加入________,并置于_________中进行扩大培养,提取抗VspX单克隆抗体与不同抗原进行杂交检测,结果如下图

实验结果表明抗VspX单克隆抗体不能与34结合,具有很强的____________,可用于后续关于牛支原体所引发相关疾病__________等方面的研究。

 0  165966  165974  165980  165984  165990  165992  165996  166002  166004  166010  166016  166020  166022  166026  166032  166034  166040  166044  166046  166050  166052  166056  166058  166060  166061  166062  166064  166065  166066  166068  166070  166074  166076  166080  166082  166086  166092  166094  166100  166104  166106  166110  166116  166122  166124  166130  166134  166136  166142  166146  166152  166160  170175 

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