【题目】科学家研究发现酵母菌中蛋白质在液泡中降解的过程,首先由一种称为自噬体的囊泡逐渐吞没细胞内受损的蛋白质和细胞器,然后与液泡相融。在液泡中,自噬体内容物被降解成更小的物质成分,为细胞提供自我更新所需的营养和材料。为验证细胞缺乏养分时,自噬体的活动也会增强,请根据以下提供的材料设计实验,写出实验思路:

材料与用具:培养瓶若干、酵母菌完全培养液、缺少营养物质的酵母菌培养液、液泡中缺乏降解酶的突变酵母菌若干(自噬体会在液泡中累积)、显微镜、载玻片、盖玻片、滴管等。

(要求与说明:酵母菌培养具体方法、装片制作过程不作要求,实验条件适宜)

1)请将以下实验步骤补充完整:

取液泡中缺乏降解酶的突变酵母菌_______________________________________________

_____________________________________________________________________________

每隔一段时间,_______________________________________________________________

统计并分析所得数据。

2)预测实验组观察结果(设计一个坐标系,用柱形图表示两次观察结果)_______

3)观察酵母菌时,视野中杂质较多,但只要掌握住酵母菌形状和内部明显的液泡,尤其是经碘液染色后呈褐色的核和________色的淀粉粒这些特点,就可以跟其他杂菌区分开来。

4)酵母菌中的液泡相当于人体细胞中的_____________,它们内部含有多种酶,这些酶原来存在于人体细胞的____________中。

【题目】香蕉果实发育初期,果肉细胞积累大量的淀粉。成熟时,果皮由绿变黄,果肉逐渐变软。

(1)香蕉的果皮和叶肉细胞以______ 为原料经作用制造糖类,再_____________到果肉中转化形成淀粉。

(2)香蕉果实成熟过程中乙烯含量增加,果肉逐渐变甜,试解释果肉变甜的原因____________

(3)测定香蕉成熟过程中淀粉水解酶D和乙烯响应蛋白H表达量,结果如图l。

由图可知,D蛋白和H蛋白含量随时间的变化趋势均为 _____________,乙烯的作用是__________

(4)为研究乙烯对D基因和H基因表达的调控机制。构建4种表达载体,分别导入香蕉细胞获得转基因植株。将各组香蕉果实分别贮存在有或无乙烯环境中,果肉横切显色结果如下表。(组成型启动子在所有细胞中保持持续活性。GUS基因的表达产物能使无色底物显现蓝色)

分组

表达载体类型

显色结果

有乙烯

无乙烯

1

组成型启动子+GUS基因

蓝色

蓝色

2

无功能启动子+GUS基因

无色

无色

3

D基因启动子+GUS基因

蓝色

无色

4

H基因启动子+GUS基因

蓝色

无色

设置l、2组作为 _________________,实验结果表明________________

(5)为探究H基因与D基因的关系,科学家筛选获得重组酵母细胞,其操作步骤如下。

①先将载体l导入亮氨酸缺陷型酵母细胞。因无转录因子蛋白作用于D基因启动子,导致AbAr基因(金担子素抗性基因)无法表达,可通过_______________筛选出重组酵母。

②再将载体2导入①步骤获得的重组酵母,接种到选择培养基上,筛选获得如图2所示重组酵母细胞。

培养基上出现菌落说明H基因的表达产物是D基因的转录因子。关于该选择培养基的配方正确是______

A. 加亮氨酸和AbA B. 不加亮氨酸,加AbA

C.不加亮氨酸和AbA D. 加亮氨酸,不加AbA

(6)综合上述实验结果,乙烯调控香蕉果实成熟过程中果肉变甜的具体路径为 __________

【题目】科研人员研究E基因和F基因对拟南芥主根生长的影响。

(1)拟南芥是生命科学研究的模式生物,2000年底已经完成全部基因测序,基因测序需要构建拟南芥的______文库,理由是 ________

(2)利用T-DNA转化拟南芥,PCR筛选E基因突变隐性纯合子(甲),原理及结果如图1.

据图分析,植株____________分别为野生型纯合子和E基因突变隐性纯合子。

(3)同样用上述方法筛选出F基因突变隐性纯合子(乙)。将甲和乙杂交,F1的表现型为 _____ (填“野生型”或“突变型”)。F1自交,若F2中突变型的比例约为1/2,说明E基因和F基因在染色体上的位置关系是____,F2中出现少量双突变体最可能的原因是___________

(4)科研人员利用三种拟南芥研究F基因与主根生长的关系,结果如图2所示。据此推测F基因____

(5)将绿色荧光蛋白(GFP)基因和F基因融合,构建表达载体,获得转基因拟南芥,荧光鉴定结果如图3,该结果不足以确定F蛋白位于细胞膜上。继续用高浓度蔗糖溶液处理液泡较小的转基因成熟荧光细胞,使其发生____,若观察到________ ,可证明F蛋白在细胞膜上。同时还需要补充一组__________作为对照。

(6)双分子荧光互补技术可研究细胞内蛋白质之间是否相互作用。将黄色荧光蛋白基因(YFP)分为2段(YFPN与YFPC),分别与已知抗原基因和该抗原的抗体基因融合构建表达载体,将两种载体同时导入拟南芥细胞,在515nm激发光下可发出黄色荧光。

①转基因拟南芥细胞能发出黄色荧光的原因是:_________会使YFPN与YFPC蛋白相互靠近。

②研究者推测E蛋白和F蛋白在细胞内形成二聚体后发挥作用。为验证该假设,请参照上述技术写出实验组的设计思路:____

 0  165914  165922  165928  165932  165938  165940  165944  165950  165952  165958  165964  165968  165970  165974  165980  165982  165988  165992  165994  165998  166000  166004  166006  166008  166009  166010  166012  166013  166014  166016  166018  166022  166024  166028  166030  166034  166040  166042  166048  166052  166054  166058  166064  166070  166072  166078  166082  166084  166090  166094  166100  166108  170175 

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