【题目】资料显示,中国每年约有13万新增宫颈癌病例,占全球新发病例的三分之一,其中约有8万女性去世。宫颈癌也是中国15岁至44岁女性中的第二大高发癌症。人乳头状瘤病毒(HPV)与宫颈癌的发生密切相关,抗HPV的单克隆抗体可以准确检测出HPV,从而及时监控宫颈癌的发生,以下是以HPV衣壳蛋白为抗原制备出单克隆抗体的过程,请据图回答下列问题:

(1)单克隆抗体制备过程中涉及的细胞工程技术有_________________________

(2)对于抗体检测呈阳性的杂交瘤细胞应尽早进行克隆化,克隆化的方法最常用的是有限稀释法,即稀释细胞到3~10个/ mL,每孔加入细胞稀释液_____ mL,使每个孔内细胞一般不多于一个,达到单克隆培养的目的。

(3)由上述过程生产出的单克隆抗体一般不能直接用于人体,理由是____________________

(4)科学家从某些无限增殖细胞的细胞质中分离出了无限增殖调控基因(prG),该基因能激发动物细胞分裂,这为单克隆抗体的制备提供了更多的思路。除本题描述的制备单克隆抗体技术外,请再简要写出一种制备单克隆抗体的思路。_______________________________________

(5)利用蛋白质工程技术对抗HPV抗体进行改造以延长其体外保存的时间,其基本途径是从_________________出发,设计_________________,进一步推测应有的氨基酸序列,进而确定对应的脱氧核苷酸序列,据此获得相应基因。

【题目】如图为三种质粒和一个含目的基因的DNA片段,其中ApR为氨苄青霉素抗性基因,TcR为四环素抗性基因,lacZ为蓝色显色基因,EcoR Ⅰ(0.7 kb)Pvu Ⅰ(0.8 kb)等为限制酶切割位点,括号内的数据是该切点与复制原点的距离。已知1 kb1 000个碱基对,请回答下列问题:

(1)片段D为目的基因中的某一片段,则下列酶能形成或断裂图中②所示化学键的有_________(多选填字母)。

a、限制性核酸内切酶 bDNA连接酶 cTaq d、解旋酶 eDNA水解酶

(2)若想获得大量的目的基因,可采用________法进行扩增,含目的基因的DNA片段共经过______次循环后刚好能形成等长的目的基因片段,复制n次需要提供特异性引物对______对。

(3)图中作为目的基因运载体最理想的质粒是________(填“A”“B”或“C”),请据图分析,其他两种质粒一般不能作为运载体的理由分别是________________________________

(4)用EcoR Ⅰ全酶切目的基因和质粒B形成的重组质粒,并进行电泳观察,可出现长度分别为1.1 kb______kb的两个片段,或者长度分别为_________的两个片段(重组质粒上目的基因的插入位点与EcoR I的识别位点之间的碱基对忽略不计)。

(5)将分别用限制酶Pvu Ⅰ切开的质粒B溶液与目的基因溶液混合,加入DNA连接酶后,进行大肠杆菌受体细胞导入操作,则受体细胞的类型(对抗生素表现出抗性R或敏感性S,蓝白代表菌落颜色)包含________(多选填字母)。

AApR、蓝色   BApR、白色 CApS、蓝色 DApS、白色

 0  165174  165182  165188  165192  165198  165200  165204  165210  165212  165218  165224  165228  165230  165234  165240  165242  165248  165252  165254  165258  165260  165264  165266  165268  165269  165270  165272  165273  165274  165276  165278  165282  165284  165288  165290  165294  165300  165302  165308  165312  165314  165318  165324  165330  165332  165338  165342  165344  165350  165354  165360  165368  170175 

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