转基因重组酵母乙肝疫苗是一种乙肝表面抗原(HbsAg)亚单位疫苗,它采用转基因的方法将乙肝病毒表达表面抗原的基因进行质粒构建,转入啤酒酵母菌中,通过培养这种重组酵母菌来表达乙肝表面抗原亚单位。转基因酵母的产生过程如图所示。质粒上有SnaBⅠ、AvrⅡ、SacⅠ、BglⅡ四种限制性酶切割位点,且酶切序列如表所示。请回答:

(1)由于HBsAg基因序列已知,因此过程①可通过___________得到大量HBsAg基因,此外也可将其连接在________上,通过大肠杆菌培养扩增。

(2)构建含抗病基因的重组质粒时,应选用限制性核酸内切酶__________(不定项选择)(A.SnaBⅠ B.AvrⅡ C.SacⅠ D.BglⅡ)对含HBsAg基因的DNA和质粒进行切割,切割一个含HBsAg基因的DNA分子需要消耗

_______个水分子。

(3)不同的微生物通常需要不同的培养基进行培养,已知酿酒酵母培养基配方为:酵母提取物10g,蛋白胨20g,葡萄糖20g,定容至1L,加入1.5%琼脂粉制成固体培养基。则其灭菌条件应为(______)

A.高压蒸汽灭菌法,且温度为121℃,压力为1kg/cm2,灭菌15分钟

B.高压蒸汽灭菌法,且温度为95℃,压力为500g/cm2,灭菌30分钟

C.将配好的培养基放在超净台中,打开紫外灯和过滤风,灭菌30分钟

D.在超净台中,打开过滤风,在酒精灯火焰旁用G6玻璃砂漏斗过滤灭菌

(4)将重组质粒导入酵母菌后,可用________法接种到固体培养基上。某同学在接种后得到如图所示的菌落分布,推测该同学接种时可能的操作失误是__________。若欲利用含卡那霉素的培养基筛选已导入HBsAg基因的酵母菌,则应使重组质粒中含有_______作为标记基因,这种培养基属于__________培养基。

(5)已知酵母菌的最适培养温度是28℃,在培养时可将培养皿倒置并放入__________进行培养。若不倒置培养将导致______________________。

 0  143366  143374  143380  143384  143390  143392  143396  143402  143404  143410  143416  143420  143422  143426  143432  143434  143440  143444  143446  143450  143452  143456  143458  143460  143461  143462  143464  143465  143466  143468  143470  143474  143476  143480  143482  143486  143492  143494  143500  143504  143506  143510  143516  143522  143524  143530  143534  143536  143542  143546  143552  143560  170175 

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