题目内容
转基因重组酵母乙肝疫苗是一种乙肝表面抗原（HbsAg)亚单位疫苗，它采用转基因的方法将乙肝病毒表达表面抗原的基因进行质粒构建，转入啤酒酵母菌中，通过培养这种重组酵母菌来表达乙肝表面抗原亚单位。转基因酵母的产生过程如图所示。质粒上有SnaBⅠ、AvrⅡ、SacⅠ、BglⅡ四种限制性酶切割位点,且酶切序列如表所示。请回答：
(1)由于HBsAg基因序列已知，因此过程①可通过___________得到大量HBsAg基因，此外也可将其连接在________上，通过大肠杆菌培养扩增。
(2)构建含抗病基因的重组质粒时，应选用限制性核酸内切酶__________(不定项选择）（A.SnaBⅠ B.AvrⅡ C.SacⅠ D.BglⅡ)对含HBsAg基因的DNA和质粒进行切割，切割一个含HBsAg基因的DNA分子需要消耗
_______个水分子。
(3)不同的微生物通常需要不同的培养基进行培养，已知酿酒酵母培养基配方为:酵母提取物10g，蛋白胨20g,葡萄糖20g,定容至1L，加入1.5%琼脂粉制成固体培养基。则其灭菌条件应为（______）
A.高压蒸汽灭菌法，且温度为121℃,压力为1kg/cm2,灭菌15分钟
B.高压蒸汽灭菌法，且温度为95℃,压力为500g/cm2，灭菌30分钟
C.将配好的培养基放在超净台中，打开紫外灯和过滤风，灭菌30分钟
D.在超净台中,打开过滤风，在酒精灯火焰旁用G6玻璃砂漏斗过滤灭菌
(4)将重组质粒导入酵母菌后，可用________法接种到固体培养基上。某同学在接种后得到如图所示的菌落分布，推测该同学接种时可能的操作失误是__________。若欲利用含卡那霉素的培养基筛选已导入HBsAg基因的酵母菌,则应使重组质粒中含有_______作为标记基因，这种培养基属于__________培养基。
(5)已知酵母菌的最适培养温度是28℃，在培养时可将培养皿倒置并放入__________进行培养。若不倒置培养将导致______________________。
