1.细菌、真菌等微生物产生的β-葡萄糖苷酶是一种耐热纤维素酶,可分解自然界中的纤维素获得能源.现可通过基因工程将β-葡萄糖苷酶基因(bg1B基因)与图1的质粒重组并导入大肠杆菌获得大量有活性的β-葡萄糖苷酶.(质粒中ori为质粒复制所必需的DNA序列,启动子是使转录开始的一段DNA序列,终止子是提供转录终止信号的DNA序列,抗生素抗性基因为标记基因,其余为不同限制酶的酶切位点,切割形成的黏性末端均不相同)
(1)从高产β-葡萄糖苷酶的黑曲霉品种中提取到相应的RNA,进而获得bg1B基因的DNA序列,这种获取目的基因的方法是通过化学方法人工合成.
(2)为避免自身环化并确保bg1B基因与图1质粒准确重组,

可选用的限制酶是B
A.NdeI和XbaI
B.NbaI和BamHI
C.XbaI
D.PstI
E.BamHI
(3)bg1B基因通过DNA连接酶与质粒结合形成重组质粒.
(4)图2培养基中含有刚果红和纤维素,可用于筛选纤维素酶产量高的重组菌,原理如图3.据此分析,图2中C菌落即为纤维素酶产量最高的菌株.
(5)在PCR扩增bg1B基因的过程中,加入诱变剂可提高基因的突变率.与用诱变剂直接处理微生物相比,上述育种技术获得热稳定性高的bg1B基因的效率更高,其原因是在PCR过程中AC(多选)
A.仅针对bg1B基因进行诱变
B.bg1B基因产生 了定向突变
C.bg1B基因可快速积累突变
D.bg1B基因突变不会导致酶的氨基酸数目改变.
 0  135605  135613  135619  135623  135629  135631  135635  135641  135643  135649  135655  135659  135661  135665  135671  135673  135679  135683  135685  135689  135691  135695  135697  135699  135700  135701  135703  135704  135705  135707  135709  135713  135715  135719  135721  135725  135731  135733  135739  135743  135745  135749  135755  135761  135763  135769  135773  135775  135781  135785  135791  135799  170175 

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