19.下面是一项“利用转基因番茄生产人胰岛素的方法”的专利摘要,请回答:本发明利用转基因番茄作为生物反应器生产人胰岛素.所用的人胰岛素基因是依据植物“偏爱”的密码子来设计所含的密码子,通过人工合成若干DNA片段,拼接而成,并且在胰岛素-COOH端加上KDEL内质网滞留序列,避免胰岛素在植物细胞中的降解.将该基因置于CaMV 35S启动子和果实专一性启动子2A12的驱动之下通过农杆菌介导的方法转入番茄中,在番茄的果实中表达人胰岛素.
(1)本专利是采用人工合成方法获得目的基因的.获得的人胰岛素基因与人体细胞中胰岛素基因的碱基序列不同,但两者所编码的蛋白质中氨基酸序列相同,原因密码子具有简并性,基因序列不同,蛋白质可以相同.要想在体外获得大量该目的基因的片段,可以采用PCR技术.该技术中使用的关键酶是热稳定性DNA聚合酶;原料是四种游离的脱氧核苷酸.
(2)根据上述摘要,转基因操作时所用的载体是农杆菌的Ti质粒,载体上的T-DNA可以转移至受体细胞,并且整合到受体细胞染色体的DNA上.构建的基因表达载体中含有:①②③⑤⑧(从下列选项中选择).
①目的基因   ②CaMV 35S启动子   ③果实专一性启动子2A12   ④引物  ⑤标记基因  ⑥内含子滞留序列  ⑦终止密码子  ⑧终止子
(3)如果要检测在受体细胞中是否存在目的基因可采用DNA分子杂交技术.该技术中使用的基因探针也可以用来检测目的基因是否转录出mRNA.还可以从个体水平进行鉴定.
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