3.为扩大可耕地面积,增加粮食产量,沿海滩涂盐碱地的开发利用备受关注.我国科学家应用耐盐碱基因培育出了耐盐碱水稻新品系.请据图回答下列问题:

几种限制酶识别序列及切割位点表
限制酶 AlaⅠ EcoRⅠ PstⅠ ScoⅠ
切割位点AG↓CT
TC↑GA
G↓AATTC
CTTAA↑G
CTGCA↓C
C↑ACGTC
CCC↓GGG
GGG↑CCC
(1)获取真核生物的基因通常采用人工合成法,通过图示中①方法合成的耐盐碱基因中是不含启动子和终止子的,如果要将耐盐碱基因和质粒重组,应该在基因两侧的A和B位置除了接上以上两个结构外,最好分别加入EcoRⅠ和SmaⅠ限制酶识别序列,这样设计的优点有利于质粒和目的基因定向连接.
(2)过程②采用PCR技术扩增目的基因时,在PCR反应体系需加入引物Ⅰ和引物Ⅱ等物质,若目的基因扩增4代,则共用了引物Ⅰ15个.
(3)请画出PstⅠ切割DNA形成的黏性末端:
(4)目的基因导入受体细胞除可用图示方法以外,还可采用花粉管通道法(或基因枪法)法.
(5)在步骤⑤⑥过程中都需用Ca2+处理两类细菌.为了确认目的基因通过⑦过程导入植物细胞中后是否成功表达,通常从分子水平进行检测的方法是用抗原-抗体杂交法.
(6)假设该抗盐碱基因D,通过基因工程导入水稻后连接到水稻的一条染色体上,则该水稻进行减数分裂的细胞在联会时有2个D基因.
(7)采用特异性引物对另两种植物花椰菜和黑芥基因组DNA 进行PCR 扩增,得到两亲本的差异性条带,可用于杂种及纯种植株的鉴定.如图是用该引物对双亲及再生植株1-4 进行PCR 扩增的结果.据图判断,再生植株1-4 中后代性状不分离的是3.
 0  128185  128193  128199  128203  128209  128211  128215  128221  128223  128229  128235  128239  128241  128245  128251  128253  128259  128263  128265  128269  128271  128275  128277  128279  128280  128281  128283  128284  128285  128287  128289  128293  128295  128299  128301  128305  128311  128313  128319  128323  128325  128329  128335  128341  128343  128349  128353  128355  128361  128365  128371  128379  170175 

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