15.回答下列有关基因表达和生物工程问题.
(1)基因工程是生物工程核心技术.下列是分子实验室中构建产生胰岛素基因工程菌的部分操作,正确流程是④②③①.(用题中编号排序)
①筛选含有胰岛素基因的受体细胞   ②胰岛素基因与运载体重组
③重组DNA导入受体细胞           ④获取胰岛素基因
如图所示为用PvuⅠ限制酶切下的某目的基因(4kb,lkb=1000个碱基对长度)及其上DNA片段示意图.

(2)片段D为目的基因中的某一片段,有关叙述正确的是BD(多选).
A.若图中的ACT能决定一个氨基酸,则ACT可称为一个密码子
B.DNA连接酶作用于②处,DNA解旋酶作用于①处
C.若只用片段D中的3个碱基对,则可以排列出43种片段
D.同一脱氧氧核苷酸链中相邻的两个碱基之间依次经过“一脱氧核糖-磷酸基-脱氧核糖-”连接
如图2所示为三种质粒示意图.图中AP为氨苄青霉素抗性基因,Tc为四环素抗性基因.EcoRⅠ(0.7Kb)、PvuⅠ(0.8Kb)等为限制酶及其切割的位点与复制原点的距离.复制原点是在基因组上复制起始的一段序列,是指质粒在受体细胞中复制时的起点.
(3)图中质粒A、质粒C能否作为目的基因运载体最理想的质粒?否(能/否).为什么,
请说明理由质粒A缺少标记基因;质粒C在用和目的基因相同的限制酶切割时,复制原点会被限制酶切割,会影响重组质粒的自主复制.
(4)用EcoRⅠ完全酶切目的基因和质粒B形成的重组质粒(EcoRⅠ在目的基因和质粒上的酶切位点如上两图所示),则进行电泳后观察可出现长度为1.1kb和5.6kb,或者分别是3.1kb和3.6kb两个片段.(重组质粒上目的基因的插入位点与EcoRⅠ的识别位点之间的碱基对忽略不计).
 0  127086  127094  127100  127104  127110  127112  127116  127122  127124  127130  127136  127140  127142  127146  127152  127154  127160  127164  127166  127170  127172  127176  127178  127180  127181  127182  127184  127185  127186  127188  127190  127194  127196  127200  127202  127206  127212  127214  127220  127224  127226  127230  127236  127242  127244  127250  127254  127256  127262  127266  127272  127280  170175 

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